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离子注A在微生物发酵I业中的应用及研究
摘 要
作为重要精细化工原料的十三碳二元酸,被广泛的应用于多种化工产品的合成
中。因其具有较高的经济价值和社会价值,所以关于其生产和应用的研究很受关注。
现代生物技术可利用热带假丝酵母,发酵石油工业产品十三碳烷烃(NC,,)来获得大
量十三碳二元酸,同时可以减少工业污染,是~项环保型新兴工业。在十三碳一元酸
的生产中,提高其产量的关键就在于:如何获得一支高产瞳热带假丝酵母菌。
本实验的主要工作是采用低能离子束注入诱变方法,以…株十二碳二二元酸产量
为29.779/L的生产用热带假丝酵母(Candida
X10“ions/era2
量20Key,剂量1×10”ions/era2至5
N’离子f
E入诱变处理,以产生具有
稳定遗传性状的高产量突变株。
在第一次离子注入诱变成功的基础上,经大量筛选后,选育出一株产率提高量
的培养基成份和发酵条件进行了调整,结合进一步的复筛_tfLI培养后,获得一株十三碳
二元酸产量为64克/升的高产突变株A324.2。
X
为出发菌,经能量20Key,剂量1×10“一5
二次注入处理后的突变菌。经筛选培养获得一株产量为73jL的高产菌株A.3,其产
酸量高出突变株A32—4.2的产量14个百分点。
实验证明,氮离子注入热带假丝酵母能够产生稳定的可遗传性突变,并可以通
过连续注入诱变的方式将其变异效果逐步累加。氮离子注八后,菌体存活率与注入离
子剂量呈马鞍型曲线变化关系。在培养过程中,经平板单菌落培养和显微镜下观察,
发现离子注入后的酵母菌菌落和细胞形态与原始菌相比较,均有明显的变化。通过对
多种离子源注入热带假丝酵母效果实验比较发现,甲烷也赴一种可以引起热带假丝酵
母菌遗传性状突变的有效气体。夕+7
本实验是离子注入热带假丝酵母工作的开始环节。在这个过程中,实现了在物
理实验室基础上将物理诱变和生物育种相结合的工作,并为今后微生物离子注入诱变
离子注A在微生物发酵I业中的应用夏研究
种工作奠定了技术基础和知识储备。
体工作得到国家自然基金重大项闷“低能离子束与7#物体相互作用”(编号 支持和天津市教委项目(编号1997112)支持。夕万
关键词:离子注入 热带假丝酵母十三碳二元酸
离子注八在微生物发酵I业串的应嗣及研究
BY IONS
NITROGEN
TROPICALISIMPLANTED
OFCANDlDA
MUTATION
ACID
DICARBOXYLIC
ITSEFECTINUNDECANE
AND
Abstract:
Candida can undecane acid
A A-3,which dicarboxylic
highproduct tropicalis produce
with
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