聚阳离子接枝修的纳米金刚石多功能转基因载体.pdfVIP

摘要 我们采用表面引发的原子转移自由基聚合技：术，在纳米金刚石(ND)表面 接枝聚甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯(PDMAEMA)，制备了一种新型的阳离予型 纳米金刚石聚合物刷。通过元素分析(EA)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、高 的纳米金刚石聚合物刷进行了表征，证实了接枝聚合反应的成功进行。并且通过 所得数据，计算得出所制备的两种纳米金刚石聚合物刷ND．PDMAEMA．1及 ND．PDMAEMA．2的接枝聚合物聚合度分别为6．3和74．9。 凝胶电泳实验表明，两种ND—PDMAEMA样品均能在很低的复合比下成功 压缩复合质粒DNA(pDNA)。透射电镜及激光粒度仪证实纳米金刚石聚合物刷 ／pDNA复合物呈球状，直径均小于200nm。复合物稳定性实验和抗DNA酶降解 能力测试结果表明，两种纳米金刚石聚合物刷样品与质粒DNA所形成的复合物 的稳定性和保护DNA免受降解的能力均优于同复合比下的线性阳离子聚合物 PDMAEMAlOO。 以荧光素酶报告基因和加强型绿色荧光蛋白报告基因考察了两种 ND．PDMAEMA样品介导的COS．7细胞的转染效率，发现其转染效率优于作为 聚焦显微技术，我们能够根据纳米金刚石的荧光效应对复合物在转染后的细胞内 的分布进行观察，成功实现了多功能转基因载体的构建。而MTT实验则显示在 达到高的转染效率的同时，纳米金刚石聚合物刷的细胞毒性要显著小于PEl25k。 在体外实验及基因治疗和细胞治疗的预临床试验中，本载体不仅能够将基因 递送到相应的治疗细胞中，同时也能够跟踪监测治疗细胞在目的组织和器官中的 分布。我们相信，这种新型的集成基因转染能力与细胞荧光标记能力的多功能纳 米基因载体在非病毒载体的发展中具有很火的应用潜力。 关键词：纳米金刚石聚阳离子原子转移自由基聚合基凶转染细胞成像 ABSTRACT Anovelcationic brushwas by nanodiamond-polymersynthesized transfer nanodiamond atomic mD)surface—initiated 2-bromoisobutyrate．modified radical of2-(dimethylamino)ethyl polymerization usedto Elemental andzeta were analysis，FTIR，HRTEM，TGApotentialanalysis confirmthesuccessful of tothedata brushes．According synthesisND—polymer theabove of obtained characterizations，the by polymerizationdegrees werecalculatedtobe6．3 and ND．PDMAEMA．1andND．PDMAEMA．2 74．9， ND·brusheswere of DNAintostable