《NANOG基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义.》.pdf

第 35卷 第 1期 中山大学学报 (医学科学版) Vo1．35 No．1 2014年 1月 JOURNALOFSUNYAT．SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jan． 2014 · 基础研究 · NANOG基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义 周嘉嘉，陈汝福 ，邓小耿 ，周 雨，周泉波，张 杰，伍耀豪，曾乐祥，邱荣林 (中山大学孙逸仙纪念医院外科 ，广东广州 510120) 摘 要：【目的】基于侧群(sP)细胞分选方法，从肝癌细胞Huh7和Hep3B中分选SP表型干细胞样肝癌细胞，观察干细 胞标记物NANOG基因在该 sP表型肝癌细胞中的表达。方【法】采用流式细胞术检测和分选肝癌细胞Huh7和Hep3B中的 sP细胞和非侧群 (NSP)细胞 ，细胞生长曲线法检测sP和 NSP细胞的增殖能力，Transwell侵袭实验检测sP和NSP细胞的侵 袭能力，M1TI1法检测 sP和NSP细胞对 5一氟尿嘧啶(5一Fu)和阿霉素(DOX)的药物敏感性 ；Real—timePCR和WB检测sP与 NSP细胞中NANOG基因的表达。 【结果】肝癌细胞Huh7和Hep3B中分选的sP细胞比例分别为 (53±0．8)％和 (13．49± 1．0)％。生长曲线表明Huh7和Hep3B的sP细胞的增殖速度快于NSP细胞 (P0．05)，体外侵袭实验结果显示Huh7和 Hep3B的SP细胞体外侵袭能力高于 NSP细胞 (P0．05)，MTI结果显示 Huh7和Hep3BSP细胞对 5一Fu和DOX有耐药性， 高于NSP细胞 (P0．05)。Huh7和 Hep3BSP细胞 NANOGmRNA平均表达水平分别是 NSP细胞的4．17和 5．51倍 (P 0．05)，NANOG蛋白平均表达水平分别是NSP细胞的3．78和5．01倍(P0．05)。 【结论】肝癌细胞Huh7和Hep3B中分选的 sP细胞符合肿瘤干细胞 的部分生物学特征，NANOG基因在sP表型干细胞样肝癌细胞中高表达。 关键词 ：肝癌 ；侧群细胞 ；肿瘤干细胞；NANOG基因 中图分类号：R735．7 文献标志码：A 文章编号：1672～3554(2014)01—0012—06 SignificanceofNANOG GeneExpressionin SPPhenotypeStem Cell—likeHepatomaCells ZHOUJia—jia，CHENRu-fu ，DENGXiao-geng，ZHOUYu，ZHOUQuan—bo，ZHANGJie， WUYao—hao，ZENGLe—xiang，QIURong-lin (DepartmentofSurgery，SunYat·senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China) Abstract：O【bjective】Toisolateandidenti~thebiologicalcharacteristicsofstemcell—likehepatomaceilsfromthehepatoma celllineHuh7andHep3Bbasedonsidepopulation(SP)cellsortingmethod，andtostudytheexpressionofNANOGgeneintheSP phenotypestemcell—likehepatomacells．M【ethods】FlowcytometrywasusedtosortSPcellsandnon—sidepopulation(NSP)cells form hepatomacelllineHuh7andHep3B， theproliferationabilityofSPcellsandNSPcellsweredetectedbycellgrowthcurve， the invasivepropertiesofSPcellsandNSPcellsweretestedbytranswe11assay，thechemotherapeuticdrugsensit