肠道菌群分子指标在脾虚治疗中药活性组分地研究中应用.pdfVIP

缩略语表 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式反应 dNTP deoxyribonucleoside 脱氧核糖核苷三磷酸 OD260 Optical Density at 260 nm 260nm 吸光度 OD280 Optical Density at 280 nm 280nm 吸光度 Taq Thermus Aquaticus DNA （polymerase ） 栖热水生菌 DNA 聚合酶 Tris Tris(hydroxymethyl) aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 Tris-HCl Tris hydrocholoride Tris-盐酸盐 EDTA ethylene diamine tetraacetic acid 乙二胺四乙酸 SDS sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠 PBS phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲液 肠道菌群分子指标在脾虚治疗中药活性组分研究中的应用 摘 要 复方是中药的主要临床应用形式。中药复方活性成分的研究不仅可 以阐明复方药理作用的物质基础，还可解释中药复方配伍的科学内涵。 脾虚证是中医临床上常见的一类证候，是慢性消化系统疾病的主要证型， 与肠道菌群的变化有密切关系。本研究将 ERIC-PCR 方法用于脾虚治疗 中药复方活性组分研究，建立了客观、准确的评价方法并对临床常用三 种脾虚治疗中药复方进行筛选，初步确定了三种复方治疗脾虚的活性组 分。 采用番泻叶、大黄水煎剂塑造脾虚大鼠模型，从大鼠粪便样品中获 肠道菌群总 DNA ，建立脾虚模型大鼠的肠道菌群的ERIC-PCR 图谱，通 过对比造模前后大鼠粪便肠道菌群的 ERIC-PCR 指纹图谱，确定脾虚大 鼠肠道菌群基因指纹特征以及脾虚治疗的评价指标体系，包括特征条带 （净面积与丰度）、多样性指数和相似性指数；运用此评价体系对临床常 用复方四君子汤、理中汤、补中益气汤的三个活性组分：乙酸乙酯部位、 正丁醇部位及水部位的治疗作用进行了考察。本研究首次采用肠道菌群 分子指标对中药复方活性组分进行筛选。 关键词：中药复方，脾虚，肠道菌群，活性组分，中药评价及筛选 APPLICATION OF INTESTINAL MICROFLORA MOLECULAR EVALUATING SYSTEM ON SCREENING THE ACTIVE SUBSTANCES OF CLINICAL RECIPES USED FOR “Pi-DEFICIENCY” IN CHINESE TRADITIONAL MEDICINE (TCM) ABSTRACT Chinese herbal recipe is a major clinical form of Chinese Traditional Medicine (TCM). Research on the active fraction of Chinese herbal recipe helps us understand the material foundation of recipe’s pharmacology and explain the essence of multicompoent of Chinese herbal recipe. As