鸭源巴氏杆菌、大肠杆菌二联多价蜂胶灭活疫苗研制与免疫应答反应动态及研究.pdfVIP

鸭源巴氏杆菌、大肠杆菌二联多价蜂胶灭活疫苗研制与免疫应答反应动态及研究.pdf

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摘要 三株分离自发病鸭场,毒力强、免疫原性好的巴氏杆菌但加D22,D23,D157作 为制苗菌株,分别以5%血琼脂培养基和马丁琼脂培养基进行固体表面培养制备 抗原,与蜂胶佐剂高速乳化,制备鸭源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌二联多价蜂胶 灭活疫苗。通过对供试鸭的攻毒保护试验、用ELISA方法对供试鸭特异性抗体 消长规律的研究以及用MTT法对供试鸭外周血T淋巴细胞免疫水平的检测三个 方面对此疫苗的安全性、免疫原性进行了研究。 安全性检验及最佳免疫剂量筛选结果表明,疫苗安全可靠,疫苗最佳免疫剂 量为4.2×109 ~ 、 存12个月。 攻毒保护试验结果表明,雏鸭首免后第14d时,一次免疫组对E.coil、P.M 的攻毒保护率分别为100%、90%,二免后第14d时,二次免疫组可产生坚强免 疫力,攻毒保护率均为100%。 本研究采用鸭巴氏杆菌、大肠杆菌全菌裂解抗原为包被抗原,建立检测 57: 161sg/mL, 菌抗原最佳包被浓度:D22:lllag/mL,D23:17ttg/mL,D1 0.5I.tg/mL。 免疫鸭抗体消长规律检测结果表明,雏鸭免疫3d后,免疫组四个血清型 E.coli抗体水平均极显著(P0.01)高于空白对照组,二次免疫组抗体水平显著 峰,然后逐渐下降,到第54d时抗体水平仍显著高于首免后第9d相应组抗体水 疫组,首免后20d左右抗体水平达到高峰,然后逐渐下降,到第54d时抗体水 平仍高于首免后第13d相应组抗体水平或相当。 T淋巴细胞转化试验结果表明,E,.coli-P.M-联蜂胶疫苗免疫雏鸭外周血淋 巴细胞转化水平在首免后极显著(P如.01)或显著ftO.05)高于对照组,二次免 疫组的细胞免疫水平比一次免疫组高,维持时间在3周左右。 关键词:鸭,大肠杆菌,多杀性巴氏杆菌,蜂胶疫苗 2 of inactived PreparationbigeminalPolyvalentPropolis vaccineofotduckcgPasteurellateurellamultocidamultociaaand’EscherEschenchta● andstudiesonits immune dynamic response Liu Yi-I抛(Microbiology) Directed Wen-can byProf.Jiang Abstract ThisresearchBseduck Escherichia.coli01、02、018、 pathogenic serotyoes s缸ailisof 078and3 PasteurellamultocidaD22,D23.D157whichwereisolatedfrom diseased deador ducks.Thesestrainshad and strongpathogenicitygood usedthemas bacterium,to imrnunogenicity.Wevaccine-makingprepareantigensby culture solidsurface 0n5%bloodmediumandMartin

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