纳米仿生界面的构建及其纳米电化学生物传感器在生物分子检测中的应用的研究.pdf

纳米仿生界面的构建及纳米电化学生物 传感器在生物分子检测中的应用研究 摘要 生物传感技术能够捕捉生物体内的各种，上物信息，为临床医学珍断、生物医 学笨础研究等提供人体生理、病理相关信息，因而它的研究已成为迫切需要发展 的课题。发展新型功能化的生物医用传感器件将为令面推进人类健康科学的发展 提供历史性的炎机。纳米技术的出现为陔领域的研究发展丌辟一个全新的天地， 巧夺天工的纳米仿生界面的构建则把牛物医用传感的进一步发展推向新的高峰。 纳米仿生界面的研究是纳米科技与生命科学的交叉领域，它可以在纳米尺度空间 上从分子层次研究生物大分子及其复合体或细胞的结构与功能，解决纳米技术在 生物医学领域应用中的基础问题，发展新技术和新方法。各国科研工作者已经在 仿，圭纳米界面上构建了各种生物传感器，用于肝炎，白m病、艾滋病以及SARS 等的检测。但是这些研究都还处于起步阶段，寻求方便、快捷的制备和组装纳米 材料的方法，构建功能化的仿生纳米界面，发展新的生物传感技术将会成为材料 学家、分析化学家以及医学家等共同努力的方向。 在本论文中，通过电化学沉积、电聚合、共价键合、吸附和表面滴涂等方法 纳米氧化物等材料进行组合组装，在玻碳电极(GCE)表而构建了用于研究DNA、 酶的固定和药物小分子检测的新犁纳米仿生界面。利用扫描电子显微镜(SEM)、 透射电子显微镜(TEM)、X射线粉体衍射仪(XRD)及紫外可见分光光度法 (DPV)、计时电流法、计时库伦分析法等对仿生界面的性质以及DNA、酶和药物 小分子在生物界面上的电化学行为进行了探讨，具体内容如下： 三种氧化物纳米材料，并通过SEM、TEM及XRD技术对合成的纳米材料进行了表 在GCE电极表面构 建 损伤。试验发现DNA的损伤主要发生在阴极处理过程。在阴极处理过程巾，界面 DNA，此反心历程与生物体内重金属损伤DNA的历程十分相像，可用于模拟匿金 属损伤DNA的活体路线。三个DNA电化学传感器均具有较高的灵敏度和良好的稳 定性，有望成为快速检测现存及新化学物质基因毒性的工具。 (2)通过电化学聚合反应、共价键合、吸附和滴涂等方式将聚硫蓖(PTn)、 在界血上的吲定和杂交进行了研究。通过EIS技术对转基因植物外源基因草丁膦 乙酰转移酶基因(PAT基因)片段进行了免试剂检测。PAT基冈片段在 3．2×1 0_4 0一‘mol／L和2．68×1 转基因大豆中提取的外源基因胭脂碱合成酶基冈终止子(NOS)的聚合酶链式反 Zr02材料制得的传感器相比，具有更宽的线性范围和更低的检测限。两种传感器 均具有长期的稳定性、良好的选择性和再生性。 复合膜修饰的GCE电极表面电化学合成了金一铂合金纳米粒子(Au—PtNPs)，构建 了用于辣根过氧化物酶(HRP)固定的纳米生物界面。在该生物界面上获得了 对界而的性能进行了研究。在最佳试验条件下，采用计时电流法，通过往连续搅 拌的PBS缓冲溶液中加入等量的H202研究了传感器对H202的安培响应。将该传感 器用于H202的测定，响应速度快(2s)，线性范围宽(1．0～2200 pmol／L)且检测 限低(O．5 性和长期稳定性，可用于实际样品中H202含量的测定。 (4)通过CV、线性扫描伏安法、计时库伦分析法，分别研究了林可霉素在 学行为。建立了快速测定两种抗生素的电化学方法。林可霉素在 分别为3．0～100．0 mg／L和10．0～80．0mg／L，检测限依次分别为1．0mg／L和8．0mg／L (SIN=3)。试验研究计算了林可霉素在电极界面上的电子转移数(n)、动力学参数 (na)及标准速率常数(k。)以及参与电极反应的H+数目等。将两种方法分别用于 实际样品中抗生素含量的检测均得到了较为理想的结果。 关键词纳米仿生界面DNA辣根过氧化物酶(HRP)抗生素电化学传感器 ONTHEC0lNSTRUCTIONOF STUDY ANDAPPLlCATIONOF nqDETERMININGB10一MOLECULES BIOSENSOR ABSTRACT