《不同NDV株V蛋白多克隆抗体的制备和初步应用 Preparation and preliminary application of different NDV strains polyclonal antibodies against V protein》.pdfVIP

第35卷第9期 中国预防兽医学报 V01．35．No．9 2013年9月 ChineseJournalofPreventive Medicine Sep．2013 Veterinary doi：10．3969／j．issn．1008-0589．2013．09．04 不同NDV株V蛋白多克隆抗体的制备和初步应用 傅 强1,2，仇旭升2，陈素娟1，谭磊2，宋翠萍2，于圣青2，丁铲p，彭大新P (1．扬州大学兽医学院，江苏扬州225009；2．中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241) 摘 要：新城疫病毒(NDv)的V蛋白是一种干扰素拮抗蛋白，该蛋白表达量的差异对NDV细胞嗜性的影响 I IINDVZJl 是目前的热点问题。为制备NDVV蛋白多克隆抗体，本研究以ClassNDV9a5b株和Class P基因为 TF载 体中，获得表达v蛋白或其CTD结构域的重组表达质粒。将重组质粒转化大肠杆菌诱导表达；纯化重组蛋白， IINDV blot检测 I和Class V蛋白的多克隆抗体。利用该多克隆抗体，western 并分别免疫小鼠，制备针对Class NDV 9a5b、La 体可以用于NDVV蛋白的检测，V蛋白在易感宿主禽源细胞中的表达量明显高于哺乳动物细胞。研究表明NDV v蛋白的表达水平与宿主细胞的种属差异相关。 关键词：新城疫病毒；V蛋白；蛋白表达；多克隆抗体；细胞嗜性 中图分类号：$852．65 文献标识码：A and ofdifferentNDVstrains Preparationpreliminaryapplication antibodies nstV n polyclonal agai protei FU Lei2，SONG Qian91--，QIUXv—shen92，CHENSu-juanl，TAN Cui—pin92， YU Da-xinl+ Chan2+，PENG Sheng-qin92，DING of Research Veterinary 225009，China；2．ShanghaiVeterinary (1．College Medicine，YangzhouUniversity，Yangzhou of Institute，ChineseAgriculturalSciences，Shanghai200241，China) Academy Abstract：TheV ofNewcastledisease asaninterferon andthe of ofV protein virus(NDV)actsantagonistimpa