《二醋酸纤维素-离子液体膜固定肌红蛋白制备过氧化氢传感器 Hydrogen Peroxide Biosensor Based on Cellulose Diacetate Ionic Liquid Film Immobilizing Myoglobin》.pdfVIP

第39卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第9期 Chinese of 1358～1362 2011年9月 Journal AnalyticalChemistry D0l：10．3724／SP．J．1096．2011．01358 二醋酸纤维素一离子液体膜固定肌红蛋白制备过氧化氢传感器 董社英¨ 谷广哲1 于竹青1 周元臻1 汤宏胜2 郑建斌2 2(西北大学分析科学研究所陕西省电分析重点实验室，西安710069) (西安建筑科技大学理学院，西安710055) 摘要将二醋酸纤维素(CDA)一(卜丁基一3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体)([bmim]BF。)一肌红蛋白(Mb)的复 合物修饰在玻碳电极(GCE)表面，制备了一种新型Mb修饰电极(CDA-[bmim]BF。一Mb／GCE)。光谱分析表明： 固定在CDA-[bmim]BF。一Mb膜中的肌红蛋白保持了其天然构象和生物活性。离子液体促进了CDA-[bmim】 BF．一Mb膜中的电子转移，极大地提高了修饰电极的导电率。Mb修饰电极对过氧化氢的还原具有明显电催化 mol／L；催化电流与过氧化氢的浓度在5．0～100 作用，其表观米氏常数K。为1．758X10_4 pmol／L范围内呈线 性关系；检出限为2．0I．tmol／L(S／N_3)。 关键词 肌红蛋白；二醋酸纤维素；离子液体；过氧化氢；电催化 1 引 言 研究蛋白质和酶的电催化过程，对于认识重要生命物质在生命体内的代谢过程具有重要意义【1’21。 目前，用于制备肌红蛋白(Mb)修饰电极的材料主要有透明质酸、介孔分子筛、碳纳米管、金属氧化物、黏 土等口一。如何开发更为有效的固定蛋白质的途径，是当前酶电极研究的热点。纤维素作为一种环境友好 型高分子材料，具有良好的可成膜性、生物相容性及生物降解性而被应用于蛋白质和酶的固定“0】。二醋酸 纤维素(Cellulosediacetate,CDA)是纤维素衍生物中最早进行商品化生产，并且不断发展的纤维素有机酯””， 但在蛋白质及酶的固定化方面的应用比较少见。因此，这方面的研究具有重要意义。CDA导电性较差，限 制其在电催化的应用，故用作蛋白质固定化时需加入电位窗口宽、导电效率高和溶解能力好的离子液 体【12131。 本研究以CDA-[bmim]BF。(1一丁基一3一甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体)复合膜将肌红蛋白(Mb)固定 于玻碳电极(GCE)表面，采用紫外一可见吸收光谱、傅里叶变换红外光谱、扫描电子显微镜及电化学交流 阻抗法对包埋于膜内的Mb进行了表征，利用}￡曲线法研究了修饰电极对H：O：的电催化性能，为氧化 还原蛋白的固定化以及电化学传感器的构建提供了一种新的生物兼容性材料。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 CHl832电化学工作站(上海辰华仪器公司)；三电极体系，工作电极为修饰玻碳电极(西一3ram)，参 Evo— 比电极为饱和甘汞电极，辅助电极为铂丝电极；SB4200DTD超声波清洗机(宁波新芝公司)；Nicolet lution kV。 300紫外一可见分光光度计(英国)；JEOLJSM一5800扫描电镜(SEM)，加速电压为15 肌红蛋白(Mb，wolsen)，实验中用pH=7．0的磷酸盐缓冲溶液(PBS)配成5．0g／L的Mb溶液；二醋酸 纤维素(CDA,陕西师范大学化学与材料科学学院