《关白附中1,6-葡聚糖及其硫酸酯的抗补体活性 Anti-complementary Activities of a (1→6) Linked Glucan from Korean Mondshood Root and Its Sulfated Derivatives》.pdfVIP

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2018-03-29 发布于河南
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《关白附中1,6-葡聚糖及其硫酸酯的抗补体活性 Anti-complementary Activities of a (1→6) Linked Glucan from Korean Mondshood Root and Its Sulfated Derivatives》.pdf

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《关白附中1,6-葡聚糖及其硫酸酯的抗补体活性 Anti-complementary Activities of a (1→6) Linked Glucan from Korean Mondshood Root and Its Sulfated Derivatives》.pdf

Vol.35 高等学校化学学报 No.7 2014年7月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 1423~1426 doi:10.7503/cjcu座机电话号码关白附中1,6-葡聚糖及其硫酸酯的抗补体活性 1,2 1 2,3 1 1 1 2,3 李晓军 ,蒋嘉烨 ,施松善 ,栗源 ,江永波 ,可燕 ,王顺春 1. 上海中医药大学教学实验中心,2. 中药研究所,中药标准化教育部重点实验室, 3. 上海中药标准化研究中心,上海201203 摘要为研究关白附多糖及其硫酸酯的经典途径抗补体活性,以关白附[Aconitumcoreanum Lévl. Raipaics] 为原料,经水提醇沉、DE-32、Superdex-200 和 Superdex-75 凝胶柱分离纯化,得到 1个均一的中性多糖 KMPS-2A. 采用高效凝胶渗透色谱法、甲基化、核磁共振和红外光谱等手段对KMPS-2A的结构进行了鉴定; 采用氯磺酸吡啶法制备了多糖硫酸酯,并测定了多糖及硫酸酯的抗补体活性. 结果表明,KMPS-2A的平均 5 相对分子量为6.76×10 ,结构为α-1,6-D-Glc链接的线性多糖;在氯磺酸与吡啶的体积比为 1.75：1.0时制备的多糖硫酸酯1.75B的取代度最高为1.79. 碳核磁谱分析结果表明,硫酸基团先后取代C2,C3及C4位. 该多糖硫酸酯的抗补体活性与其硫酸基团取代度呈现一定的相关性,多糖硫酸酯1.75B的经典途径抗补体活性优于阳性对照药肝素,表明其具有开发成为补体抑制剂的潜力. 关键词多糖;关白附;补体中图分类号 O629.12 文献标志码 A 关白附为毛茛科乌头属植物黄花乌头[Aconitumcoreanum Lévl. Raipaics]的干燥块根,是一种传 [1] 统的中药 ,可用于治疗胃灼伤、心疼、口眼歪斜、癫痫、婴儿惊厥、破伤风和风湿性关节炎等疑难杂 [2,3] 症 ,其提取物具有治疗心律不齐、止痛和抗炎的作用. 补体系统非正常激活会引起系统性红斑狼疮 [4,5] [6] 和风湿性关节炎等疾病 . 目前,天然产物多糖类及其衍生物补体抑制剂的研究备受关注 . 研究发现,茶多糖硫酸酯可增强对经典补体途径的抑制作用, 同时对补体系统的激活具有靶向抑制作 [7] [8] 用 ;刺山柑多糖硫酸酯明显提高了经典补体途径的抑制作用 . 本文从中药关白附中分离纯化出均一多糖,并对其结构进行鉴定,同时制备了其多糖硫酸酯,并研究其经典途径抗补体活性,进而得到具有补体抑制剂潜能的关白附多糖硫酸酯,为补体系统非正常激活引起的疾病用药提供了参考. 1 实验部分 1.1 试剂与仪器关白附饮片购于上海康桥中药饮片厂并由上海中医药大学教学实验中心可燕教授鉴定为Aconitum coreanum Lévl. Raipaics 的干燥块根;DE-32,Superdex-200和Superdex-75 凝胶柱为美国 GE公司产品;单糖标准品和二甲亚砜 DMSO 等试剂均为Sigma公司产品;肝素钠购于上海国药集团化学试剂有限公司批号:F座机电话号码,效价/U/mg≥150.0 ; 补体从健康豚鼠血液中获得;溶血素购自上海国药集团化学试剂有限公司批号:. Agilent1100series 高效液相色谱仪;KS-805及 KS-804 型色谱柱日本Shodex 公司 ;Bruker AVANCEⅢ400M核磁共振仪 25℃下测定,以丙酮为内标 ;AgilentQQQ7000气相色谱-质谱联用仪;利穗EZPurifier分离纯化系统;Perkin-Elmer2000红外光谱仪美国Thermo公司 . 1.2 实验过程 1.2.1 关白附多糖的提取与分离纯化取关白附饮片1kg,用石油醚脱脂,用5L水在100℃下提取收稿日期:2013-12-24. 基金项目:上海市卫生局中医药科研基金批准号:2012J008A 和国家科学自然基金批准号:座机电话号码资助. 联系人简介:可燕,女,博士,教授,主要从事中药活性成分筛选方面的研究. E-mail:keyantcm@163.com 王顺春,男,博士,研究员,博士生导师,主要从事糖化学和糖生物学研究. E-mail:shunchunwang@126.com 1424 高等学校化学学报 Vol.35 3h,反复2次,提取液浓缩至2L, 用4倍体积乙醇醇沉,离心,沉淀物挥发除去乙醇,用蒸馏水溶解后冻干得到关白附粗多糖. 称取10g粗多糖,用蒸馏水溶解,离心,取上层清液用DE-32 阴离子交换柱层析,依次用水、0.2和0.4mol/