《5株堆形艾美耳球虫线粒体cox3基因的增及序列分析》.pdfVIP

中国畜牧兽医 2010年第37卷第6期 生物技术 ·63· 5株堆形艾美耳球虫线粒体cDx3基 因的扩增及序列分析 谢雯琴1，谭志坚2，符德文2，丘丽玲3，翁亚彪3，刘毅1。林瑞庆3，徐民俊3 528138； (1．湖南农业大学动物医学院，长沙410128；2．佛山市正典生物技术有限公司．佛山 3．华南农业大学兽医学院，广州 510642) 摘要：以5株堆形艾美耳球虫为研究对象，对其线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅲ亚基(c凹3)的部分基因(弘∞3)进行了PCR 扩增、测序及序列分析。并与GenBank上已发表的顶复门原虫相关序列进行比较，研究其线粒体c∞3基因遗传变异情况。结 果每个虫株均获得572 与疟原虫和住白细胞虫相应序列的相似性分别为51％和50％，而与泰勒虫的相似性少于50％。本研究首次报道了堆形艾美 耳球虫pcDz3序列，结果显示不同来源的堆形艾美耳球虫弘。鹋序列没有差异，与毒力无关，为进一步研究艾美耳球虫的群体 遗传学奠定了基础。 关键词：堆形艾美耳球虫；线粒体DNA；foz3；序列分析 中图分类号：S852．72 文献标识码：A 文章编号：1671—7236(2010)06一0063一04 分子量小、结构简单、进化速度快、母性遗传、无组织 鸡球虫病是由孢子虫纲(Sporozoa)、艾美耳科 (Eimeriidae)、艾美耳属(邑mP一口)的7种球虫寄生 特异性等特点，是研究寄生虫分子分类、群体遗传、 于鸡的肠道中引起的，分布很广，世界各地普遍发 生，凡是养鸡的地方都有可能存在球虫(王鑫等， 2007)；这7种球虫分别是柔嫩艾美耳球虫(E．￡“一 线粒体基因，是呼吸链重要组分，有研究结果表明， zP咒口)、巨型艾美耳球虫(E．mnzi仇口)、堆形艾美耳 包括∞z3在内的细胞色素c氧化酶最保守，对其序 球虫(E．nfPr伽zi行口)、毒害艾美耳球虫(E．，z已c口一 列进行克隆和分析是研究物种分子系统演化和分类 f，．肠)、布氏艾美耳球虫(E．6r“，z“fi)、和缓艾美耳球 虫(E．研砸s)和早熟艾美耳球虫(E．夕r口P∞z)，所 鸡球虫co硝的相关报道。本试验以5株堆形艾美 有种的球虫均有一定的致病性(Morris，2007)。自 耳球虫为研究对象，设计引物对其线粒体∞z3序列 然感染时常表现为两种以上球虫混合感染。鸡球虫 进行PCR扩增及序列分析，以期为研究鸡球虫 感染危害大，据统计每年给中国养鸡业造成数十亿 mtDNA基因的分子结构、基因表达、种群之间的关 元损失(王鑫等，2007)。堆形艾美耳球虫由Tyzzer 系提供理论基础。 于1929年首次报道(Doran，1978)，寄生于鸡的小 l材料与方法 肠，中等毒力，是集约化养鸡场流行率最高的球虫之 1．1试验虫株本试验共用5个堆形艾美耳球虫 一，对养鸡业的危害仅次于柔嫩艾美耳球虫(林矫矫 虫株，均通过内转录间隔区(ITS)序列分析确定虫 等，2001)。 种；其编号、毒力