《LC-MSMS同时测定5种探针底物代谢产物和快速评价细胞色素P450同工酶的活性》.pdfVIP

中国药物警戒第10卷第5期 2013年5月 May, 2013, Vol.10, No.5 中图分类号：R969 文献标识码：A 文章编号：1672-8629（2013 ）05-0263-06 LC-MS/MS同时测定5种探针底物代谢产物和快速评价细胞色素 P450同工酶的活性 * 叶林虎 孔令提 肖冰心 王倩 何晓曦 曹方瑞 常琪 （中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所 ，北京100193） 摘要：目的 建立同时测定奥美拉唑（CYP2C19 ）、右美沙芬（CYP2D6 ）、睾酮（CYP3A4 ）、氯唑沙宗（CYP2E1 ）和甲苯磺 丁脲（ CYP2C9 ）5 种探针底物代谢产物的 Cocktail 体外方法，快速评价药物对人肝微粒体细胞色素 P450 同工酶活性 的影响。 方法 通过人肝微粒体与 5 种探针底物在还原系统 NADPH 的作用下，于 37℃水浴条件下共同孵育 ，采用液 质联用（LC-MS/MS ）分析方法，测定探针底物的代谢产物生成量来评价各P450 同工酶的活性。 结果 建立了同时测 定 5 种 P450 同工酶活性的酶反应条件和 LC-MS/MS 分析方法，数据显示该方法具有良好的线性和分析灵敏度，以 及具有良好的准确度 、精密度、重现性，可用于药物间相互作用的体外快速评价。 结论 可用于体外快速评价药物对 相应的 CYP450 亚型酶活性的影响，以预测潜在的药物相互作用。 关键词：细胞色素 P450 ；Cocktail ；LC-MS/MS ；药物相互作用；体外 Simultaneous Determination of the Activities of Five Major Cytochrome P450 Enzymes by an in Vitro Cocktail Method Coupled with LC-MS/MS Assay * YE Lin-Hu KONG Ling-Ti XIAO Bing-Xin WANG Qian HE Xiao-Xi CAO Fang-Rui CHANG Qi (Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100193, China) Abstract: Objective To develop an in vitro Cocktail method coupled with liquid chromatography/tandem mass spectrometry(LC-MS/MS) assay for simultaneous determination of the activities of five major cytochrome P450 (CYP450) isoenzymes by monitoring the metabolites of five probe substances including omeprazole(CYP2C19), dex－ tromethorphan(CYP2D6), testosterone(CYP3A4), chlorzoxazone(CYP2E1), tolbutamide(CYP2