荷斯坦奶牛FSHR基因5’侧翼和第10外显子多态性及和超数排卵关系研究.pdf

7侧翼和第10外显子多态性及其与超数 荷斯坦奶牛FSHR基因5 排卵关系的研究 摘要 7侧翼调控区和第 本实验将FSHR基因作为繁殖性状的候选基因，对其5 10外显子进行扩增、测序、序列比较和PCR-SSCP检测，研究该基因在荷斯 坦奶牛不同个体之间的差异以及基因多态性与奶牛超数排卵处理效果的关 系，为进一步优化荷斯坦奶牛超数排卵技术和提高可用胚胎数提供分子水 平的依据。实验结果如下： 1．根据GenBank报道的山羊FSHR 引物，以荷斯坦奶牛、沼泽型水牛和河流型水牛的基因组为模板，应用PCR 技术，克隆和测定了FSHR基因57侧翼和第lO外显子序列。序列比较分析结 果表明，FSHR基因57侧翼序列长度在三个牛品种之间存在差异，其中荷斯 来自碱基插入／缺失的数目差异。以荷斯坦奶牛序列为准，沼泽型水牛发生 了32个碱基变异、1个碱基缺失及3个碱基插入；河流型水牛发生了24个碱 基变异和3个碱基插入，而序列同源性为98．9％的沼泽型水牛与河流型水牛 发生了10个碱基突变和1个碱基缺失。 牛与荷斯坦奶牛序列相比，同源性分别为99．1％和98．7％，分别有ll处幂1：115 处碱基变异，其中5处引起氨基酸改变；而序列同源性高达99．5％的沼泽型 水牛与河流型水牛发生了6个碱基突变，引起l处氨基酸密码改变。 2．采用PCR-SSCP技术对荷斯坦奶牛FSHR基因57侧翼和第10外显子进 段存在多态，且群体多态信息含量均达到了中度多态(O．5PICO．25)。 C—G、C—T和C—T碱基突变；统计表明优势基因型为从型，基因型频率0．50， 平衡状态。 生C—T、T—C和A—G碱基突变；统计表明优势基因型为AA型，基因型频率’ 0．53，优势等位基因为A，基因频率为0．708；X2检验表明，荷斯坦奶牛 平衡状态。 生C—G、C—T和A—C碱基突变；统计表明优势基因型为BB型，基因型频率 O．58，优势等位基因为B，基因频率为0．736；X2检验表明，荷斯坦奶牛 平衡状态。 n 3．分析发现：三个片段的基因型对排卵数、可利用胚胎数及胚胎可利用 0．05)，可利用胚胎数及胚胎可利用率的差异均不显著；年龄木基因型效应 对排卵数和胚胎可利用率的影响均不显著。 关键词：FSHR基因5 III OFTHE5-FLANKING ONPOLYMORPHISM STUDIED EXONl0OFFOLLICLE REGIONAND THEIR AND HORMONERECEPTOR(FSHR)GENE INHOLSTEIN TOSUPEROVUIATION RELATIONSHIP COWS ABSTRACT candidateofthe Inthis FSHR waschosenasthe gene study,thegene 10were and trait．Its andexon amplified，blasted breeding 5-regulatingregion te