核算杂交技术,聚合酶链反应.ppt

核算杂交技术 概述 分子生物学的重要方法之一 使用特定标记的已知核酸序列与待测核酸进行特异性的杂交结合，形成杂交体，并利用相应的显示技术来检测目标核酸的存在及其位置的分子生物学方法 基本原理 核酸 由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。不同的核酸，其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同，核酸可分为核糖核酸，简称RNA；和脱氧核糖核酸，简称DNA。DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础，RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用，其中转移核糖核酸，简称tRNA，起着携带和转移活化氨基酸的作用；信使核糖核酸，简称mRNA，是合成蛋白质的模板；核糖体的核糖核酸，简称rRNA，是细胞合成蛋白质的主要场所。 核酸的结构与特征 核酸的结构 一级结构：核苷酸以3’，5’磷酸二酯键构成无分支结构的线性分子 二级结构：双螺旋结构 或局部双链 三级结构：超螺旋结构 四级结构：DNA与蛋白质形成复合物 核算的结构与特征 核酸的特性 核酸的变性作用 爆发式 Tm值 核酸的复性作用 骤然冷却 缓慢冷却 核酸的杂交 在适宜的条件下，将不同来源的DNA放在试管里，经热变形后，慢慢冷却，让其复性。若这些异源DNA之间在某些区域有相同的序列，则可以通过互补碱基多之