p53和c-myc在细胞周期调控及其苯并（a）芘致癌过程中作用机理研究.pdf

摘要 影响细胞周期调控相关基因的表达，导致细胞周期的有序性和精确性受到破坏，造成细胞周期紊 乱，甚至恶性转化，最终发生癌变。人胚肺成纤维细胞(human embryoniclungfibroblast,HELF) 细胞没有影响．因此说明BaP能显著促进细胞的生长和增殖，并且具有p53表达依赖性．其次， 对BaP作用后细胞内p53及下游基因和蛋白的表达进行了检测，结果表明BaP显著上调HELF DI、CDK2、CDK4和 和A549细胞内p53mRNA和蛋白的表达，同时促进p53下游基因eyclin CDK4的表达上调，进而影响细胞周期的有序进行。 抑癌基因p53在BaP影响细胞周期调控的过程中发挥重要作用。p53作为转录因子，可诱导下 游相关蛋白的表达，从而达到调控细胞周期的作用．本研究利用野生型和突变型p53质粒分别转 染A549细胞，结果表明野生型p53可以延缓细胞生长，减小细胞体积。使细胞周期阻滞于Gl期。 野生型p53对细胞周期的调控是通过降低cyclinA、eyclinE、CDK2和CDK4的表达，同时增加p2l DI、CDK2、CDK4和p21的表达，并且下调eyclinA和eyelinE的表达。结果表明细胞在BaP损伤后 会诱导p53的表达，使细胞周期阻滞于Gl期进行损伤修复，但p53无法拮抗化学致癌物高浓度长时 间的刺激，BaP作用细胞后cyelinDI、CDK2和CDK4的表达上调，从而干扰p53对细胞周期的负调 控。 原癌基因c-myc在细胞周期调控中发挥重要作用，在周期紊乱细胞和大量癌细胞中都可以检 和p27表达减少。同时我们利用RNAi技术，将e-myc A、CDK2和 表达的A549内，发现其G1期细胞增多，S期细胞减少。cyelinD3，eyelinE、cyclin DI在两种细 表达阻滞A549细胞于Gl期。其q3eyclinA相对于c-mye表达改变是最敏感的，而eyelin A、D3、E、 胞中无显著变化。因此c,-myc调控细胞周期可能存在下述一种机制，即依赖于cyelin D1。 CDK2、CDK4、p2l和p27而不依赖于eyelin 关键词：p53、c,-mye、BaP、细胞周期、细胞大小 Abstract achemical in itcaninduce environment,andgene Benzo(a)pyrene(BaP)iscarcinogenexisting mutationoraffectthe ofcell modulation-relatedcell orderand expressioncycle genes，destroyedcycle transformationandcancer．Human embryonicfibroblast(HELF) fidelity,andgeneratedmalignant lung celllineA549hasnormal human andhumanadenoeareinoma level，while lung