PILP通过和HOPs复合体VPS41亚基相互作用调控胞吞途径.pdfVIP

摘要 摘要 HOPs复合体在细胞的内膜系统的统一性与自动化方面发挥合理调节的职能， 蛋白质的膜泡运输普遍存在于整个细胞生命活动中，具有重要的生物学意义。 虽然人类基因组中编码HOPs各个亚基的基因已经被克隆鉴定，但是有关 其功能的鉴定还很少，并且HOPs复合体在哺乳动物的生物活性功能调控机制 的研究还是空白。HOPs复合体作为Rab7的粘附因子或GEF(鸟苷转移因子) 来调节早期内体到晚期内体的转变以及晚期内体膜的成熟。以上调节机制在酵 母细胞中研究的较为全面，但是对于在哺乳动物细胞中相关调节机制的了解还 是很局限的。 胞中的相互作用蛋白进行了较为系统的探索，研究的主要结果如下： 免疫荧光实验表明，HOPs复合体的六个亚基和I渤7在细胞内没有共定位， 但同时过表达ⅪLP(＆lb7的下游效应因子)和HOPs复合体，发现ⅪLP和 复合体的各个亚基(除VPS33)募集到晚期内体的囊泡膜上。同时，通过 后通过一系列的免疫荧光实验和GST-pulldown实验表明，发现ⅪLP的氨基端 与HOPs复合体相互作用，即不依赖于Rab7的作用。其中，Ⅵ，S41亚基是通过 其羧基端与ⅪLP直接相互作用的蛋白，在砒LP．HOPs复合体的相互作用中发 挥关键作用。通过EGFR内吞实验，发现当使用RN舢干扰技术将VPS41干扰 后，EGFR的降解过程明显受到抑制，说明HOPs复合体在EGFR介导的内吞 途径中发挥重要作用，在此过程中可能还会受到Rab7和赳LP的影响。 本研究结论有助于进一步丰富HOPs复合体在哺乳动物中的细胞内膜泡运 输途径及其调控机制，为内吞途径的研究提供了新的理论依据，并为其他VPS 蛋白的研究提供借鉴。 关键词：HOPs复合体；ⅪLP；I己ab7；EGFR降解 Abst阳ct Abstract HOPs collsistsofsix conlplex 1．HOPs a endomembrane Ⅳps4 compleximplementsregulato巧109ic也atgoVems of exists thewhole1ife idemi锣anddyn锄ics．V色sicular仃{msportproteintllrou曲out of tlle seIlSe． cell，itimportantbiological eachsubullitof Altllou曲tl：屺lnlIIlall HOPs genoIneencoding gene complex lKlvebeenc10nedaIld ofidemificationare kno啪．At identified，its缸1ction rarely researchabout廿lemecha血smof f．unctionsh2us presemⅡle bioaCtiVe impoIrtant in relevantcell and劬ction．Buttllis6eld si嘶丘cancerevealiI培me physiolog)r l搬Venotbeen f．aCtor e)(tensiVely．HOPs or ilwestigated coInplexserVes舔tetlle血g nucleo