安体舒通和抑肝纤联合应用对防治大鼠肝维化作用的动态的分析.pdf

中文摘要 安体舒通与抑肝纤联合应用对防治大鼠肝纤维化作 用的动态研究 摘 要 目的：我国是乙型肝炎的高流行区，慢性乙型肝炎患 者超过3000万，这些人中约有25％．40％的患者最终发展为 肝硬化或肝癌。目前，对肝硬化或肝癌尚无特异、有效的治 疗。故研究如何延缓、阻断甚至逆转肝纤维化向肝硬化的发 展成为当前研究的热点。现已证明醛固酮是胶原合成和有丝 分裂的强烈刺激之一。国内外已有不少研究证实：醛固酮能 够促进肝纤维化的形成而醛固酮拮抗剂能明显减轻肝纤维 化程度。有些实验发现，在纤维化形成的早中期时，醛固酮 拮抗剂的抗肝纤维化作用相对明显，但这种观点是否正确还 未被大量实验所证实。目前对醛固酮促肝纤维化的作用机理 还并不清楚。中药复方抑肝纤具有延缓、阻断甚至逆转肝纤 维化作用，这在我科的前期工作中已被证实。在本实验中设 立安体舒通与抑肝纤联合应用组和安体舒通单独应用组两 组动物，通过对比它们的疗效以验证安体舒通对肝纤维化的 防治作用是否存在局限性，观察两药联合应用能否弥补安体 舒通晚期治疗时的不足，并对醛固酮促肝纤维化机理和抑肝 纤防治肝纤维化的作用机制做出初步的探索。 维化模型组：皮下注射40％四氯化碳溶液。②安体舒通于 预组：在给予40％四氯化碳溶液皮下注射的同时给予安体 舒通灌胃。③安体舒通与中药复方抑肝纤联合应用组：40％ 中文摘要 四氯化碳皮下注射，在6周以前给予安体舒通，6周后加入 中药抑肝纤灌胃治疗。在3、6、9、12周时分别于各组随机 选取大鼠进行宰杀，留取标本分别进行以下项目检测：常规 系统测定胶原面积；比色法测定肝组织匀浆羟脯氨酸含量： 利用流式细胞分析仪测定平滑肌肌动蛋白一a(Q．SMA)阳 性细胞数；免疫组织化学染色观察1一型纤溶酶原激活物抑 制物(PAl一1)分布及表达量，并用多媒体彩色病理图文分 析系统检测阳性面密度。 结果：①在模型组，9周之前，纤维化分期、胶原含量， 羟脯氨酸量都逐渐升高，12周时，尽管已停止四氯化碳溶 液皮下注射3周，但模型组的纤维化分期、胶原含量、肝匀 浆羟脯氨酸量并无明显下降；②在安体舒通组，与模型组相 比，6周以前安体舒通的应用可以降低纤维化分期、减少肝 组织胶原含量，降低肝组织羟脯氨酸量，而在9周时效果不 明显，提示醛固酮存在促肝纤维化作用，但只是在肝纤维化 形成的早中期时效果明显；③在安体舒通与抑肝纤联合应用 组，6周之前效果与安体舒通组相同，9周时，与模型组相 比，抑肝纤的应用仍可降低纤维化分期，减少肝组织胶原含 量，降低肝匀浆羟脯氨酸量，表明抑肝纤具有延缓肝纤维化 的作用：12周时，联合用药组的纤维化分期、胶原含量，肝 匀浆羟脯氨酸量明显低于模型组，且低于同组9周时，表明 抑肝纤除具有延缓肝纤维化作用外还具有一定的逆转肝纤 维化作用，通过与9周后安体舒通组的疗效对比发现：安体 舒通与抑肝纤联合应用后能够达到良好疗效；④在9周之 前，无论是模型组还是安体舒通组，随着时间的推移，活化 中文摘要 的肝星状细胞数、PAl。l蛋白表达量都逐渐升高，二者呈现 出一致的变化规律，提示它们之间可能存在某种联系。而且 活化的肝星状细胞数、PAI．1蛋白表达量与纤维化分期、胶 原含量、羟脯氨酸量的升降变化～致，3、6周时安体舒通 组均明显低于模型组。推测醛固酮促肝纤维化作用与肝星状 细胞活化和PAl．1蛋白表达有关：⑤在联合用药组，9周时 活化的肝星状细胞数、PAI一1蛋白表达量也与反映肝纤维化 程度的指标变化一致，均明显低于模型组，故抑肝纤延缓肝 纤维化作用也与此二者有关。 结论：(1)在早中期时醛圄酮可以促进肝纤维化的发 生，其拮抗剂安体舒通可以起到预防实验性肝纤维化的作 用。但晚期时作用不明显。(2)中药抑肝纤与安体舒通联合 应用时具有良好疗效，能够弥补安体舒通晚期应用时的彳i 足。(3)醛固酮促肝纤维化的作用机理可能与HSCs活化、 PAl，l蛋白表达有关。(4)抑肝纤延缓肝纤维化作用与减少 HSCs活化、减少PAI一1蛋白表达有关。 关键词：肝纤维化；安体舒通；抑肝纤；醛固酮；Ⅱ．SMA； 羟脯氨酸；PAl一1；模型 英文摘要