芹菜黄酮合成酶Ⅰ基因的克隆与序列分析.pdfVIP

江苏农业学报 (JiangsuJ．ofAgr．Sci．)，2014，30(4)：855～862 http：／／wWW．JSnYXb．COrll 855 陈逸云，王 枫，徐志胜，等．芹菜黄酮合成酶I基因的克隆与序列分析[J]．江苏农业学报，2014，30(4)：855—862 doi：10．3969／j．issn．1000-4440．2014．04．026 芹菜黄酮合成酶 I基因的克隆与序列分析 陈逸云， 王 枫 ， 徐志胜， 谭国飞， 李梦瑶， 熊爱生 (南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室，农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，园艺学院，江 苏 南京 210095) 摘要： 选用3个芹菜材料六合黄心芹、津南实芹和美国西芹 ，分别从中克隆了合成黄酮类化合物的关键酶基 因——芹菜黄酮合成酶 I基因(AgFS，)。该基因全长均为 1616bp，含有 359bp的内含子 I和 190bp的内含子 II。 芹菜AgFS，基因编码 355个氨基酸，属于20G—Fell—Oxy超级家族。序列分析结果显示，3种芹菜中AgFS，基因在 核苷酸水平上有5个碱基的差异 ，编码的氨基酸有5个位点的差异。芹菜黄酮合成酶 I(AgFS，)与其他来源植物 的FSI氨基酸多重序列比对分析结果表明，该酶具有高度保守性。对AgFS，进行进化树分析 ，氨基酸序列的疏水 性／亲水性分析，三级结构预测与分析，结果显示AgFSI与同属于伞形科的胡萝 b和孜然芹的FSI进化关系最近， AgFSI属于疏水性蛋白质，3种芹菜AgFSI的空间结构相似。 关键词 ： 芹菜；黄酮合成酶 I；基因克隆；序列分析 中图分类号： s636．3 文献标识码 ：A 文章编号： 1000-4440(2014)04-0855-08 CloningandsequenceanalysisofflavonesynthaseIgeneinApium graveo— lens CHEN Yi—yun， WANG Feng， XU Zhi—sheng， TAN Guo—fei， LIMeng—yao， XIONG Ai—sheng (StateKeyLaboratoryofCropGeneticsandGermplasmEnhancement，Min~tryofAgriculture／KeyLaboratoryofBiologyandGermplasmEnhancementof HorticulturalCropsinEastChina，CollegeofHorticulture，NanjingAgriculturalUniversity，Na ng210095，China) Abstract： TheflavonesynthaseIgene(AgFS，)，thekeygeneforflavonoidssynthesis，wasclonedfromApium graveolenscultivarsLiuhehuangxinqin，JinnanshiqinandMeiguoxiqin，respectively．ThelengthofAgFS，genewas1616 bp．containing359-bpintronIand190-bpintronⅡ．TheAgFS，geneencodes355aminoacids．belongingtothe20G— FeIIOxysuperfamily．Thereweredifferencesin5nucleotidesitesand5aminoacidsitesamongthethreecuhivarsofA口— — lzmgraveolens．MuhiplesequencealignmentofAgFSIswithFSIsrfom otherplantsshowedthatFSISwerehighlyeonser— vative．PhylogenetictreerevealedtheAgFSIshadtheclosestrelationshiptoDaucuscarotaandCuminum cyminum