舒肝健骨方与阿那曲唑联用对MG-63细胞BMP-2和Runx2 mRNA及蛋白表达的影响.pdfVIP

第37卷第5期2014年5月 北京中医药大学学报 Vo1．37 No．5 May，2014 JournalofBeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine 325 · 中医药实验研究 · 舒肝健骨方与阿那曲唑联用对MG一63细胞 BMP-2和 Runx2mRNA及蛋 白表达的影响 李元青 韩淑燕 李萍萍 (北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所 恶性肿瘤发病机制及转化研究 教育部重点实验室 北京 100142) 摘要：目的 研究中药舒肝健骨方对人成骨肉瘤MG-63细胞骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨特异性 转录因子(Runx2)基因表达和蛋 白合成的影响，探讨其对骨合成代谢的影响机制。方法 MG-63细 胞培养及传代，分组药物干预：对照组，阿那 曲唑组，舒肝健骨方组，联合用药组，培养48h后，抽提细 胞总RNA，实时荧光定量PCR检测BMP．2和Runx2mRNA表达；提取细胞总蛋 白，蛋 白免疫印迹法 检测蛋 白合成的变化。结果 联合用药组和舒肝健骨方组BMP-2和Runx2mRNA表达上调，2组 BMP-2mRNA相对表达量分别是对照组的1．65、2．34倍，Runx2mRNA的相对表达量分别是对照组的 1．41、2．33倍，差异有统计学意义，阿那 曲唑组BMP一2和 Runx2mRNA的表达下调。联合用药组、舒 肝健骨方组BMP-2和 Runx2蛋 白的表达上升，BMP．2蛋 白的相对表达量分别是0．75、1．01，Runx2蛋 白的相对表达量分别是0．07、0．12，而阿那 曲唑组二者的表达降低，与对照组比较虽无统计学意义，但 与其余2组比较有统计学意义。结论 中药舒肝健骨方对骨合成代谢有促进作用，这可能是通过上 调BMP一2及其下游特异性转录因子Runx2mRNA的表达及蛋 白合成而实现的。 关键词：舒肝健骨方；阿那 曲唑；骨形态发生蛋 白-2；骨特异性转录因子 中图分类号 ：R285．5 doi：i0．3969／j．issn．1006-2157．2014．05．009 InfluencesofShuganJianguFangcombininganastrozoleonexpressions ofBM P-2mRNA ／protein andRunx2mRNA ／protein inM G-63 cells LIYuan—qing，HAN Shu．yan，LIPing—ping (KeyLaboratoryofCarcinogenesisandTranslationalResearch ofMinistryofEducation，Peking UniversitySchoolofOncology，BeijingCancerHospitalandInstitute，Beijing 100142) Abstract：Objective TostudytheinfluencesofShuganJianguFangongeneticexpressionsandprotein synthesisofbonemorphogeneticprotein2 (BMP一2)andRunx2 inMG-63cells，anddiscussits mechanism ofinfluencingboneanabolism．M ethods MG-63cellswereculturedandpassagedinvitro， anddividedintofourgroupsandintervenedwithdifferentdrugs：controlgroup，anastrozolegroup(ANA group)，ShuganJianguFanggroupandcombininggroup．Afterculturedfor48h，thetotalRNAwas extractedfrom MG-63 cells．TheexpressionsofBMP-2mRNA andRunx2mRNA weredetectedbyusing real—timefluorescencequantitat