甘薯病毒病及其检测技术.ppt

甘薯病毒病及其检测技术 报告人：张玮华 甘薯病毒病 检测技术 展望 甘薯 旋花科，甘薯属的栽培种，同源六倍体。 属一年生或多年生蔓生草本。又名山芋、红芋、番薯、红薯、白薯、地瓜、红苕等，因地区不同而有不同的名称。 地下根顶端通常有4～10多个分枝，各分枝未端膨大成卵球形的可食用块根。 无性繁殖方式：薯块育苗繁殖 ，茎蔓繁殖 （品种退化，病毒积累，产量下降） 甘薯上的病毒种类 目前，全世界报道的甘薯病毒共有32种，属于9个科 雀麦花叶病毒科（Bromoviridae）； 本扬病毒科（Bunyaviridae）； 花椰菜花叶病毒科（Caulimoviridae）； 长线性病毒科（Closteroviridae）； 豇豆花叶病毒科（Comoviridae）； 联体病毒科（Geminiviridae）； 马铃薯Y病毒科（Potyviridae） Flexiviridae ； Luteoviridae； 马铃薯Y病毒科（Potyviridae） 甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV，分布最广） 甘薯病毒C (SPVC) 甘薯潜隐病毒 (SPLV) 甘薯G病毒 (SPVG) 甘薯病毒2(SPV2) 甘薯轻斑点病毒 (SPMSV) Potyviridae基本特征 Potyvirus 病毒粒体线条状； 在受侵染植物细胞中产生风轮状、卷轴状内含体； 蚜虫传播； 基因组为单链正义RNA 甘薯褪绿矮化病毒（SPCSV） 长线性病毒科（Closteroviridae），毛形病毒属(Crinivirus)，是唯一侵染甘薯的长线性病毒； 病毒颗粒850-950 nm，直径12 nm； （+） ssRNA，含两条RNA，大约17 kb. 甘薯病毒病害(SPVD) SPFMV 和 SPCSV 协生共侵染引起 SPFMV 和 SPCSV单独侵染症状轻微 SPVD的危害 潜伏侵染：病毒侵染后，在植物体内增殖，但植物不表现症状的现象； 隐症带毒: 受到侵染而不表现症状的植株 SPVD显症植株的产量比健康减少79-86% ； 比SPCSV 单独侵染植株产量减少62-72%； SPVD爆发流行对甘薯生产造成严重危害。 检测技术 生物学方法 血清学方法 分子生物学方法 展望 由此可以看出，分子生物学方法将成为甘薯病毒病检测的发展放向； RT-PCR技术可以对未知病毒进行检测，并以此为基础发展出了简并引物PCR和复合引物PCR技术，拥有诸多优势。 目前，本实验室通过分子生物学检测方法，检测到采自鄂州的甘薯植物叶片内的病毒有：Sweet potato feathery mottle virus（SPFMV），Sweet potato chlorotic stunt virus (SPCSV)， Cucumber mosaic virus (CMV)。 * 症状特点 变色： 花叶、斑驳、黄化 坏死： 顶死、坏死斑、 环斑、条斑、条纹 畸形： 皱缩、卷曲、 果面凹凸、矮化 叶片皱缩型 叶片黄化型 薯块龟裂型 丛枝型 卷叶型 花叶型 叶片斑点型 症状类型 生物学方法 目测法（外观症状诊断法） 指示植物检测法（巴西牵牛、普通牵牛） 血清学方法 酶联免疫吸附法（ELISA） 免疫电镜法（ISEM） 分子生物学方法 核酸杂交技术（NASH） RT-PCR技术 优点： 缺点： 操作简单，成本低 对病毒灵敏性差，不能准确判定病毒及其种类 优点： 缺点： 操作简单，高效，特异性强，快速 (NCM)-ELISA 抗血清制备时间长，假阳性反应，具有株系专化性，多种病毒检测灵敏度低 优点 缺点 灵敏度最高，特异性最强，简单快速，适于普遍应用 NASH需检测大量样品，处理复杂，探针分离比较困难，有放射性污染