最近频繁用到酶标仪，对od值和吸光度值(abs)的概念和其线性范围不.docVIP

最近频繁用到酶标仪，对OD值和吸光度值(abs)的概念和其线性范围不甚理解，查了很多资料，包括园子里前辈的总结和我从其他网站上获得的，也包括我个人的理解，在此做更全面的总结（因为园子里的都是N年前的老帖子，且不是很全面，呵呵）希望能供战友们参考1、首先明白什么是朗伯比尔定律朗伯——比尔（Lambert－beer）光吸收定律：A＝－lgT＝εb cA——吸光度，又称光密度“O.D”。T——透光度， T＝I / I。， I。——为照射到吸收池上的光强，I——为透过吸收池的光强。ε——摩尔吸光系数或克分子吸光系数（L?mol－1?cm－1）。b——样品光程（cm），通常使用1.0cm 的吸收地，b=1cm。C?——样品浓度（mol/L）。由上式可以看出：吸光度A与物质的吸光系数“ε”和物质的浓度“C”成正比。2、OD值定义OD值(optical density)表示某一物质在某一个特定波长下的吸光度；ABS是吸光值absorbance的缩写. 在分析化学里,某一化学物质都可吸收一定波长的光,并且对光的吸收度与此化学物质的浓度成正比.因此可以利用吸光度的大小来测定某种物质的浓度.其中某物质在特定波长下对光的吸收度,就是OD值,一般用经过石英管后的光强比上照射到石英管前的光强来表示.3、吸光度值（abs/AU）定义吸光度,absorbance,是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度 与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数，影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等。　　吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关，只要光的波长被固定下来，同一种物质，吸光系数就不变。　　当一束光通过一个吸光物质（通常为溶液）时，溶质吸收了光能，光的强度减弱。吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。　　吸光度用A表示。　　A＝abc，其中a为吸光系数，单位L/(g·cm),b为液层厚度（通常为比色皿的厚度），单位cm ， c为溶液浓度，单位g/L　　影响吸光度的因数是b和c。a是与溶质有关的一个常量。此外，温度通过影响c，而影响A。　　符号A，表示物质对光的吸收程度。 97801 式中I0是通过均匀的液体介质的一束平行光的入射光的强度；It是透射光强度；T是透射比。A值越大，表示物质对光的吸收越大。根据比尔定律，吸光度与吸光物质的量浓度c成正比，以A对c作图，可得到光度分析的校准曲线。在多组分体系中，如果各组分的吸光质点彼此不发生作用，那么吸光度便等于各组分吸光度之和，这一规律称吸光度的加和性。据此可以进行多组分同时测定及某些化学反应平衡常数的测定。在吸光度测定中，为抵消吸收池对入射光的吸收、反射以及溶剂、试剂等对入射光的吸收、散射等因素，可选用双光束分光光度计，并选光学性质相同、厚度相等的吸收池分别盛待测溶液和参比溶液。4、国外资料的权威总结Optical density can also refer to index of refraction.In spectroscopy, the absorbance A (also called optical density) is defined as: Aλ=log10(I0/I)where I is the intensity of light at a specified wavelength λ that has passed through a sample (transmitted light intensity) and I0 is the intensity of the light before it enters the sample or incident light intensity (or power). Absorbance measurements are often carried out in analytical chemistry, since the absorbance of a sample is proportional to the thickness of the sample and the concentration of the absorbing species in the sample, in contrast to the transmittance I / I0 of a sample, which varies logarithmically with thickness and concentration.Absorbance vs transmittanceAbsorbanceTransmittance (I / I0)Percent transmittance