基因工程菌 K88-K99融合蛋白高密度发酵工艺的初步研究.pdfVIP

动物医学进展 。2015，36(10)：43—47 ProgressinVeterinaryMedicine 基 因工程菌 K88一K99融合蛋 白高密度发酵工艺的初步研究 谢金文 。，李书光 ，肖跃强 ，王文秀 ，唐 娜 。，董 林 。，李 峰 ，沈志强 (1．山东省滨州畜牧兽医研究院／山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广 中心，山东滨州 256600； 2．山东绿都生物科技有限公司，山东滨州 256600) 摘 要 ：通过培养基 LB、改良LB、改良LB+微量盐、改良Minca和2×YT+10g／L葡萄糖 5种培养基 进行筛选，设定培养基初始pH分别为 6．0、6．5、7．0和 7．5四个梯度进行蛋白表达 ，用全 自动微生物生长仪 每隔30min测定菌液的OD值 ，最终确定2×YT+5g／L的葡萄糖生长茵数较多，细菌生长速度快，pH7．0 时蛋白表达量较高，并且通过细菌生长 曲线得 出最佳诱导时机为细菌培养开始后 3．0h～3．5h，诱导时长 4．0h，溶氧量控制在 30 ，为 ETEC大肠埃希菌高密度发酵工艺的研 究提供 了基础数据。 关键词 ：K88—99；培养基 ；高密度发酵；融合蛋 白 中图分类号 ：$852．612 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—5038(2015)10-0043—05 致病性大肠埃希菌为革兰阴性短杆菌，可引起 的预防和治疗带来极大 困难D-a]。寻找一种有效预 肠道外感染和急性腹泻，主要通过污染饮水、食 品等 防该病的方法 已经势在必行 ，逢媛等对致病性大肠 引起疾病暴发流行 ，其分布广泛 ，发病率高 ，给该病 埃希菌菌毛蛋 白基 因进行 了整合 ，并且融合蛋 白表 收稿 日期 ：2015—02—27 基金项 目：山东省 自然科学基金青年基金项 目(ZR2012CQ012，ZR2013CQO06，ZR2014CQ009，ZR2014CQ010)；山东省现代农业 产业技术体系生猪创新团队项 目(SDAIT-06—011—14)；滨州市2013年科学技术发展计划项 目(2013GCA)304) 作者简介：谢金文(1981一)，男，安徽人，助理研究员，硕士，主要从事兽医微生物与免疫学及畜禽用生物制品研究。 ImmuneEffectofImm uneComplexVaccineof InfectiousBursaiDiseaseinSPF Chicks ZHANG Zhen—hua，LILin，JING Xiao—dong，ZHANGJian—wei，SHEN Jia，SHIAi—hua， HUANGFeng—jun，ZHENGXiao—lan，JIANGBei—yu (InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine，BeijingMunicipalAcademyofAgricultureandForestry，BeijingKey LaboratoryforPreventionandControlofInfectiousDiseasesinLivestockandPoultry，Beijing，100097，China) Abstract：One-dayoldSPFchickenswerevaccinatedwithIBD immunecomplex(IC)vaccineandlivevaccinere— spectively，pathologicallesionsoffabriciusbursain chickenswereobservedatthe9thdayafterimmunization．On thedayof14，21and28postinoculation，bloodsamplesweretakenandtheIBD neutralizingantibodytiterswere tested．ExperimentalchickenswerechallengedwithhighvirulentIBDV at