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- 2016-01-21 发布于江苏
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细胞破碎技术—高压匀浆法
摘要:细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。目前已发展了多种细胞破碎方法,以便适应不同用途和不同类型的细胞壁破碎。 破碎方法可规纳为机械法和非机械法两大类。机械破碎主要的方法有珠磨法、高压匀浆法、撞击破碎法和超声波等方法。本文主要介绍高压匀浆法,高压匀浆法的应用以及高压匀浆机的介绍和使用。
关键词:细胞破碎 高压匀浆法 高压匀浆机 影响因素 应用
1、高压匀浆法破碎细胞原理
高压匀浆法是大规模破碎细胞的常用方法,作用机理是液体剪切作用,利用高压使细胞悬浮液通过针形阀,由于突然减压和高速冲击撞击环使细胞破碎,细胞悬浮液自高压室针形阀喷出时,每秒速度高达几百米,高速喷出的浆液又射到静止的撞击环上,被迫改变方向从出口管流出。细胞在这一系列高速运动过程中经历了剪切、碰撞及由高压到常压的变化,从而造成细胞破碎。
破碎属于一级反应速度过程,被破碎的细胞分率符合如下公式:
ln[1/(1-R)]=KNPɑ
式中 R — 破碎率,为N次循环后,蛋白质的释放量Rn与最大释放量Rm之比;
K - 与温度有关的速度常数;
N - 悬浮液通过匀浆器的次数;
P - 操作压力,MPa;
ɑ- 与微生物
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