柴胡皂甙促胰腺腺泡酶分泌与胞内钙离子浓度变化的动力学的分析.pdfVIP

摘 要 本项研究建立了表征胰腺腺泡细胞酶分泌的动力学测量技术，和检测细 胞内钙离子浓度动态变化的荧光光谱技术，对柴胡总皂贰及其单体的药物作用 特征和机理作了较全面的研究。 研究证实柴胡总皂贰确有促胰腺腺泡细胞酶分泌作用，并具有剂量依赖 性，随药物浓度增加促分泌效应加强。通过对其促泌动力学的研究发现加入药 物后的 0-10分钟内是高促分泌作用阶段而后分泌速率逐渐下降，进入低促泌 阶段。30mi。后分泌速率与基础分泌速率基本相同。柴胡总皂贰升高胞内比a21]1 可分为两个时相，前2分钟细胞内[[Cap];快速升高后又有所一「降，第二时相胞 内[C扩`],再次升高5分钟时达到峰值后逐渐缓慢下降。第二时相 比az]峰值 的出现与细胞外Ca内流紧密相关。 柴胡皂贰单体 I有显著促泌作用，随药物浓度增加促分泌效应迅速增 长，1.0-mol/L药物促分泌动力学曲线可分为三个时相，前 5分钟为低促分泌 期， 5-15分钟为高促分泌期，而后分泌速率逐渐降低至25分钟后降到基础值 附近。柴胡皂贰单体 1升高胞内C〔al门，的动力学变化亦可分为两个时相 第一 时相的Ca][[ :峰，主要依赖胞内钙池释放钙，第二时相的比a21;峰，主要依 赖胞外Ca`内「流入胞。 关键词 : 柴胡总皂贰 [Ca] 胰腺腺泡细胞 酶分泌 [Cal] 柴胡皂试单体 ABSTRACT Weimprovedthetechniqueofmeasuringtheproteinconcentrationandestablishedthe techniqueofmeasuringtheCatconcentrationbymeasuringthevalueoffluorescenceofFluo- 3-Cawhichmakeusabletostudythetime-courseofproteinsecretionandcytosolicfree [Ca2],.Wehavedonelotsofhardworktostudytheprincipleofdrugsaction Saikusideenhancespancreaticacinarcellssecretionandtheefficiencyincreaseswhenthe concentrationofSaikusideincreases.Wefindthatthetime-courseofenzymesecretion stimulatedbySaikusidecanbedividedintotwoperiods.TherateofSaikusidestimulating secretionisthebiggestinthefirst10min,thentherateofenzymesecretiondecreases,afterabout 30mintherateisequaltotherateofbasicproteinsecretion.Thisphenomenonsuggeststhatthe mainfunctionofsaikusideistopromotethecourseofproteinreleaseandithasntobviouseffect toenzymecomposing.Saikusidecanincreasethecytosolic[Ca],.Itstime-coursehastwo periods.Thecytosolic[Ca?*],.increasesquicklyin2minwhenSaikusidestimulatingacinar cells,thenitincreasesagainat5minandthisvalueishigherthanpreviousone.Wefindthe second[Ca2],.increaserelysontheinfluxofextracellularCa2,andthefirstcytosolic [Ca2],.increasereliesonthereleaseofintracellularCa2pool Themonomer1ofSaikusidecanenhanceacinarcellssecretion,andtheefficiency increaseswhe