刺参（Sticopus japonicus）体壁胶原蛋白理化性质和生物活性研究.pdfVIP

japonicus)体壁胶原蛋白的理化性质和 生物活性研究 摘要 刺参(Stichopusjaponicus)是一种传统的滋补佳品，含有多种生物活性物 质，具有抗凝血、免疫调节、降血脂、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用。刺参体 壁蛋自含量的40％以上为胶原蛋白，但是由于它的不溶解性，关于它的相关性 质报道很少。本文采用胃蛋白酶促溶的方法从刺参体壁中提取胶原蛋白，并研究 了它的理化性质、对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性和体外抗氧化活性。 本文的主要工作及结论如下： 促溶的方法提取胶原蛋白(PSC)。对实验中各主要影响因素进行了分析，实验结 果表明以胶原提取率为指标，胃蛋白酶提取的最佳条件为：pH2．0，温度为4℃， 底物浓度m(刺参体壁)：m(醋酸溶液)=l：10，加酶量6％，提取时间为48h。 (2)系统地研究了刺参体壁胶原蛋白的理化性质。胶原蛋白为一种糖蛋白， 经硫酸一苯酚法测定，其含糖量为2．7％。测定了产物的紫外图谱，符合胶原蛋 自的特征。从刺参体壁提取的胶原蛋白的氨基酸组成与I型胶原蛋白的氨基酸组 成相似。在此基础上对其进行了SDS—PAGE电泳，胃蛋白酶促溶性胶原蛋白是一种 异三聚体的蛋白，推测由两条叭链和一条Ct2链组成№1)姆2】。胃蛋白酶提取的刺参 胶原蛋白最大程度地保持了其天然结构。热变性温度为24．3℃，刺参独特的组织 特征与其热变性温度有很大的关系。刺参体壁胶原蛋白最高溶解度出现在pH2～ 3。当NaCl浓度大于8％以后，溶解度则随盐浓度的增大而剧烈下降。与甘油相比， 刺参体壁胶原蛋白显示出更好的保水性。 (3)研究了对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制效果，实验结果表明了，刺参 体壁胶原蛋白具有较高的抑制活性，ICm值为1．34mg／mb。 (4)研究了刺参体壁胶原蛋白在邻苯三酚自氧化体系中对超氧阴离子的清除 作用和在Fenton体系中对羟基自由基的清除作用。胶原蛋白对超氧阴离子的清 除作用随着浓度的增加而增大，当浓度为3mg／mL时，对超氧阴离子的清除率可 达32．56％。但是刺参体壁胶原蛋白对羟基自由基的清除作用不明显，当浓度为 20mg／mL时，对羟基自由基的清除率仅为5．5％。 关键词：刺参；胶原蛋白：提取：理化性质；ACE抑制活性；抗氧化活-陛 II 013 charactersand StudyphysicochemicaI bi0IogicaI sea of fromthe of cucumber actiVitiesCOIIagen body (St icus) ichopusjapon Abstract Fromthenutritional cucumberisanidealtonicfood．Sea viewpoint，sea has contains bioactivesubstancesand cucumber many manypharmacological of functions thelevels immunology，decreasing includinganticoagulantenhancing blood 40％ofthetotal wall