calt;39;2+gt;、cam及其目标酶与乙烯诱导番茄和草莓果实成熟衰老关系的研究.pdf

中文摘要 研究了跃变型果实番茄和非跃型果实草莓不同成熟度以及粉红期两种果实 采后置于低温和常温下后熟衰老过程中与成熟衰老有关的主要生理生化指标的 变化。结果表明，番茄果实成熟衰老过程中乙烯释放率、呼吸强度、多聚半乳糖 醛酸酶(1，(；)活性、番肺红素、叶绿素以及细胞壁可溶性蛋白均发生较明显的变 化：而草莓果实成熟衰老过程中呼吸和乙烯的变化4iⅢJ显，但活性氧代谢、uJ溶 性蛋白含量和组分却发生了较明显的变化，表明番茄和草莓的成熟衰老特征不 同。 研究表明，乙烯诱导绿熟期番茄乙烯高峰和呼吸高峰提前出现，促进㈧活 性，促进番茄红素积累、叶绿素分解和细胞壁可溶性蛋白提高，表明乙烯足诱导 和加速番嫡果实成熟衰老的根本原因。乙烯对草莓呼吸强度、SOD、0j以及moj 均无影响，但却明显促进内源乙烯生成、诱导34KD特异蛋白表达和加速后期细 胞可溶性蛋白分解，说明乙烯与草莓呼吸作用和活性氧代谢系统关系不大，可能 通过促进乙烯自我催化、诱导特异蛋白表达和促进口r溶性蛋白分解来参与调控草 莓果实成熟衰老。 ， Ca2+专一性螯合剂(EGTA)与乙烯一起处理绿熟期番茄果实和乳白期草莓果实， 均可抑制乙烯诱导番茄和草莓的乙烯生成、番茄PG活性的提高、番茄红素含量 的增加和细胞壁可溶性蛋白含量的增加以及草莓可溶性蛋白的分解，表明阻断质 膜Ca2+通道或螫合胞外Ca2+以减少胞内Ca2+能抑制乙烯对果实的催熟作用，间 接证明乙烯对果实成熟衰老的诱导与胞外cJ+内流引起的胞质ca”浓度的增加 密切相关，表明乙烯信号转导可能与钙信使有关，调节胞质ca”浓度可调节乙烯 对果实的催熟作用。 是草莓成熟衰老过程中，CaM含量变化均有相似的趋势，但不同果实CaM高峰 出现的时叫不同，衰老快的草莓果实较衰老慢的番茄果实CaM高峰出现时J、uJ早， 这与果实的贮藏寿命有关。低温相应延缓CaM高峰的出现，表明CaM含量变化 与果实成熟衰老密切相关。乙烯促进草莓和番茄果实CaM增加，外加Ca”促进 这一作用，相反，阻断钙通道或减少胞外ca”均能抑制这一作用，表明乙烯对 V CaM的诱导依赖于细胞ca”浓度的变化。乙烯对CaM的诱导与乙烯浓度有关。 果实中乙烯诱导的呼吸作用增强、PG活性提高、番茄红素含量增加和草每乙烯 释放率上升以及可溶性蛋白的分解。表明CaM介导乙烯对番茄和草莓果实主要 成熟衰老指标的诱导作用。本文认为Ca”一CaM信使系统可能参与乙烯对跃变型 果实番茄和非跃变型果实草莓成熟衰老的诱导作用。 活性高峰在衰老快的草莓果实中比在衰老慢的番茄果实中出现得早，其活性开始 下降意味着果实进入衰老阶段，低温也能延缓ca“．ATPase高峰出现并使其保持 较高活性，表明ca”一ATPase与果实的成熟衰老密切相关。 乙烯处理绿熟番茄果实和乳白期草莓果实能显著促进微粒体膜Ca”一A3’Pase 活性，贮藏后期由于乙烯处理的果实比对照衰老快，因此c铲+．ATPase的活性低 于对照。研究表明乙烯对果实微粒体膜Ca”．ATPase活性的影响与乙烯的浓度和 处理时阳J有关，乙烯启动和加速果实成熟衰老的同时不仅与胞内ca”浓度和CaM 含量增加有关，而且与CaM的目标酶ca2+．Al^l，ase活性有关。 钙调素拈抗剂CPZ和TFP能抑制乙烯诱导番茄果实和草莓果实微粒体膜 活性，间接证明该酶属于CaM敏感型。钙通道阻断剂Vp预处理绿熟番茄果实 和乳白期草莓果实以及不同浓度Vp预处理绿熟番茄果皮圆片，均完全抑制乙烯 ca2+内流引起的胞质ca”浓度增加有关。 CaM的另一重要目标酶NAD激酶在草莓和番茄果实成熟衰老过程中与 NADP磷酸酶活性一样，变化趋势完全不同，说明果实后熟衰老过程中这两种酶 的变化凶果实种类不同而异。但尤论草每还是番肺果实，采后NAD激酶的变化 均与呼吸变化趋势相似，NADP磷酸酶活性变化与乙烯变化趋势相似。因此， Ifl：f参与果实呼吸作用和乙烯生成的调节从而影响其后熟衰老过程。 低温在降低番茄呼吸和乙烯释放率的同时促进NAD激酶活性和抑制NADP 磷酸酶活性。激活NADK可能有利于延缓果实后熟哀老。 乙烯处理绿熟期番茄果实和乳白期草莓果实均抑制NAD激酶活性，不『叫浓 度的乙烯处理绿熟番茄果皮圆片后，10和50,u矗B1．L“的乙烯均对NAD激酶活性具 有抑制作用。乙烯对番茄NADP磷酸酶活性具有促进作用，而且以10和 501a囊1．L。浓度作用效果明显，而对