几种浮游植物检方法的研究.pdfVIP

第一章 前言 赤潮(RedTide)，从广义上讲，指的是在某种海域环境条件下，一些单细 胞浮游生物爆发性繁殖，引起水色异常的生态现象。它不一定有毒或有害。日常 生活中，狭义上的赤潮主要指的是对环境有毒或有害的一种浮游生物爆发性繁殖 Bloom， 的生态现象。这种赤潮有一个准确的名称叫做有害藻水华(Harmful Algal HAB)。在特定的条件下，几乎所有藻都能发生藻华，大多数藻华都是无毒或无 害的。但有些种类藻华能产生毒素，危害附近生活的其他生物，甚至通过食物链 威胁到人类和更多的其他生物。还有一些虽然不产生毒素，但是其生物量累积到 一定程度时，能对环境起到极大的危害作用。例如太湖近年频频发生的蓝藻藻华， 蓝藻无毒，蓝藻藻华能污染水源，降低水中含氧量，是鱼类死亡。这两种藻华统 称为有害藻水华(赤潮)。 有很多种因素能导致赤潮的发生，具体的机制尚未研究清楚。近年来随着环 境污染日益加重，大量营养盐流入大海，导致近海富营养化同益明显，赤潮的爆 发的频率的规模呈现急剧扩大的趋势。同时人类对环境监测重视程度的提高，有 关赤潮爆发的报道越来越频繁，赤潮这种海洋生态现象越来越为公众所熟知。我 国近海是赤潮的高发地，近年来赤潮发生的次数和规模也呈现增长趋势，给海水 养殖业、海洋环境乃至人们的健康与安全带来了极大的威胁(易晓蕾，2003，周 名江等，2001，2003)。 为了减少赤潮带来的危害，人们开发了许多技术来监测赤潮，希望能尽快的 了解发生藻华的藻的种类，以判明该藻华是否有害。赤潮生物检测技术的研究也 etaL，1998；Mudie 就成为赤潮监测的重要内容(Kim etaL，2002)。早期的检测 技术主要是基于形态和结构分类学开发的技术，如显微镜和电子显微镜检测等。 由于赤潮生物形态的相似性和复杂性，这些技术在实际应用中存在困难，无法准 确的检测。例如一些形态学上非常相近的种类和变种或形态学相似的但生理功能 不同的种类，这些利用光学显微镜就很难分辨出来。随着科技的快速发展，赤潮 生物检测技术也出现了巨大的进步，例如随着分子生物学的发展，人们开发了分 子检测技术。分子检测技术和自动化技术的结合，又出现了自动化检测技术。 1．1常规的赤潮生物检测技术 目标藻种类的鉴定和生物量的确定赤潮藻检测的两大基本任务。种类的鉴定 是定性检测，能提供赤潮藻危害的性质。而生物密度和生物量是赤潮发生和生长 的重要指标，它是赤潮发生、发展、消亡以及赤潮规模最直接的证据，同时也是 衡量细胞生长和生理活性的重要指标。相关的目前，我国基本上是采用显微镜检 测的方法来检测藻，辅以细胞计数方法来监测赤潮生物密度和生物量，从而对目 标藻进行定性和定量的分析。近年来开发的一些分子检测技术中，分子技术也只 能进行定性检测，定量通常还是采用细胞计数的方法。经典的细胞计数方法如显 微镜计数比较耗时费力，于是开发了基于分光光度法的技术方法，例如胡先文 (2001)曾将这种方法用于鱼腥藻水华的细胞密度检测。其他类似的细胞计数方 et a1．，19981 法也有一些，如库尔特计数、FlowCAM计数和流式细胞计数(Sieracki 等方法，这些技术中，流式细胞计数相对常见。 色素技术也常在赤潮监测中。例如选用简单、快速的叶绿素a来表征浮游植 et a1．，1978)，同时借助吸收光谱的差异还可以区分不 物的碳生物量(Sieburth 同的浮游植物类群(KoehneetaL，1999)。现场荧光检测可以用于现场的连续快 速测定。然而，此方法受赤潮藻类光合色素组成变化的影响，只能把浮游植物分 为几个大类群，进行初步定性，藻的准确检测还需其他的技术。 1．1．1光学显微镜和电子显微镜检测技术 光学显微镜检