比较基因组杂交技术在鉴定染色体异常中的应用的分析.pdf

摘要 Genomic 比较基因组杂交(Comparative 可以在全部染色体水平上对整个基因组序列的拷贝数进行全面的检 测并进行初步定位。其基本原理是用不同的荧光染料标记正常的基因 组DNA和待测组DNA，再和正常人的中期染色体杂交，通过检测染 色体上两种荧光信号的相对强度比率，从而了解待测组DNA拷贝数 的改变。这种技术最初应用于实体瘤的研究，现已广泛应用于血液系 统疾病，染色体病，产前诊断以及植入前诊断等方面。 越来越多的研究表明，CGH技术不但具备荧光原位杂交 (FluorescentInSitu 制备染色体特异区域探针且仅能检测个别染色体或部分位点的局限 性。一次实验即可检测出待测标本整个基因组DNA拷贝数的增减， 大大提高了了染色体病诊断的全面性与准确性，是一种全方位的检测 方法。因此，CGH技术作为一种新的有效的分子遗传学方法正被国 内外学者应用于各种染色体疾病的诊断。 若将CGH技术应用到临床诊断中去，必须先在实验室建立这项 技术。为此，首先利用已知的有染色体异常的建株细胞DNA为待测 样本进行检测，再得到与细胞遗传学一致的结果上稳定实验条件，随 后再进行对未知标本的检测。 额外的小标记染色体(Small Marker Supernumerary 生率约为0．4％-1．5％。带有标记染色体的患者，其多变的临床表型是 由于标记染色体所含的遗传物质导致的。标记染色体形态学的多变性 和其较高的发生率给遗传咨询特别是产前诊断带来了巨大的困难，快 速简便的鉴定标记染色体的来源也变得越来越重要。本实验将一例已 知来源的额外小标记染色体患者的建株细胞DNA作为待测样本进行 了检测，所得结果与分子细胞遗传学结果一致。从而证明了CGH技 术作为对额外小标记染色体来源的检测，是一项快速简便方法，仅通 过一次杂交就将范围缩小到特定区域，为下一步挑选合适的细菌人工 Artificial 染色体(Bacterial ’ 据。 另一方面通过对已知样本的检测不断优化实验条件，使实验技术 稳定下来为进一步将该技术应用于临床提供一个技术平台。同时通过 实验也证明CGH技术对于DNA拷贝数改变的检测是一简便有效的 方法。 关键词CGH，FISH，染色体病，额外标记染色体 Ⅱ ABSTRACT Genomic established Comparative by Hybridization(CGH)，first in Kallioniemi amolecularmethod of 1992，is showing genetics capable anoverviewof thewhole and and these genomedetectinglocatiingcopy number were changes．CGHexperimentsperformedbyusingdirectly fortestDNA green—dUT