马铃薯晚疫病水抗性与β-氨基丁酸诱导抗性防卫系统基因表达的差异.pdf

摘 要 2008年被联合国宣布为“国际马铃薯年”，彰显出马铃薯作为世界上第四大粮食 作物在粮食安全和消除贫困中所具有的至关重要的作用。由致病疫霉[Phytophthora infestans0√tont．)deBar／]引起的晚疫病作为第一大粮食作物病害，在世界各地流行 频繁，已成为制约全球马铃薯生产和发展的重要因素。化学药剂防治晚疫病的手段 由于引起环境污染、农药残留以及抗药生理小种的产生等一系列问题而受到诟病， 利用马铃薯自身的防御机制来提高抗病能力已成为晚疫病防治的一种新思路。主效 R基因控制的垂直抗性很容易被新的病原茵生理小种克服，由微效多基因控制的水 平抗性囡其抗性稳定持久，越来越受到育种家的亲睐。马铃薯对晚疫病的抗性还能 acid，BABA)即能 经外界生物或非生物因子所诱导。13．氨基丁酸(B．aminobutyric 诱导这种抗性，且诱导的抗性具有水平抗性的特征。然而目前对水平抗性和13．氨基 丁酸诱导抗性的机理研究还很薄弱，极大限制了抗性机制的深入研究和抗性资源的 充分利用。本研究旨在通过比较水平抗性和BABA诱导抗性差异表达基因的异同， 了解马铃薯晚疫病水平抗性与诱导抗性之间的关系，探索BABA诱导抗性和晚疫病 水平抗性产生的分子机理。取得的主要研究结果如下： 1．以剔除了来源于Solanumdemissum的RJ琅JJ的马铃薯植株为材料，喷施不同 浓度的BABA，然后接种P A=预处 理3d和4d能有效诱导马铃薯对晚疫病的抗性。 (BABA．IR)产生过程中差异表达的片段，其中49个差异片段为P infestans和BABA 共同诱导表达，说明BABA在很大程度上通过激活植物防卫体系来表达诱导抗性。 并且多数共同诱导表达的片段对BABA的响应速度更快，说明诱导植物防卫基因的 明，共同诱导表达的差异片段的同源基因参与抗病反应的各个方面，包括与信号传 导和转录调控有关的基因以及与植保素和生物碱生物合成相关的基因等。利用病毒 诱导的基因沉默体系初步验证两个差异片段在诱导抗性中起重要作用，进一步证明 所筛选的差异表达基因确实参与了植株对晚疫病抗性的反应。 3．部分筛选出的差异表达片段与参与SA和JA信号传导途径相关的基因同源， 表明SA和JA依赖的信号传导途径可能参与到BABA诱导抗性产生的过程中来。这些 信号传导相关的差异片段同样能被Pinfestans诱导表达，意味着BABA启动了植物本 身所具有的抵御病原入侵的信号途径，马铃薯BABA诱导抗性与水平抗性的抗性机 制存在更为广泛的交联。 4．利用电子克隆和RACE相结合的方法克隆了一个晚疫病菌和BABA共同诱导 指基序，该基因可能为马铃薯WRKY转录因子家族中的一个成员，GenBank登记号 定量RT-PCR结果表明，P 上调表达：茉莉酸甲酯和伤害分别在处理后12h和24h才开始诱导该基因的表达。这 些工作为进一步深入研究WRKY5的功能奠定了基础。 关键词：马铃薯，晚疫病，B．氨基丁酸，水平抗性，cDNA．AFLP，差异表达片段， 病毒介导的基因沉默，StWRKY5基因 Ⅱ Abs仃act has declaredtheInternationalYearofthePotatotheUnited 2008 been 1f1忙year by that thefourth vitalrolesin Nations，notingpotato，as largestcropspecies，callplay facing food and late securityeradicatingpoverty．Potatoblight,causedbyPhytoph