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木豆凝集素的提纯、部分性质及生物学活性研究 摘要 豆类是人、畜植物蛋白主要来源，食用豆类在三大食用作物(谷类、 豆类、薯类)中排名第二。豆科植物的根瘤固氮占生物固氨总量的40％。 木豆是唯一可食的木本豆类，发源于印度次大陆，已有6000多年的栽培历 史，属热带、亚热带作物，一年生或多年生。木豆耐干旱、耐贫瘠，蛋白 质含量高(平均21．5％)，营养丰富，在我国西南地区可用于遏止石漠化、 保持水土、恢复生态，同时还收获粮食、饲料。 凝集素是一类可促使细胞凝集的蛋白质，最早在豆科植物中发现，普 遍存在于微生物、植物、动物机体中。能与糖分子结合是凝集素的一个典 型性质，这使凝集素能与动物肠道上皮细胞表面结合，破坏刷状缘膜和主 要吸收细胞的结构，引起营养吸收面减少，从而使植物凝集素具有广泛的 抗虫谱。医学研究认为，植物凝集素具有抗癌、防癌活性；农业研究发现， 豆类凝集素可能是根瘤菌的识别受体。 本研究发现，木豆凝集素(粗样)可以通过50％硫酸铵饱和度盐析从 木豆籽粒干粉生理盐水浸提液提取，效率1．15％。供试的不同品种木豆， 其凝集素的凝血性不一样，．但都能凝集兔红血球。木豆凝集素粗样品先经 rose 4B)亲和层析，再经过 过伴7J,W凝集素一琼脂糖凝胶(ConASepha 交联葡聚糖凝胶(SephadexG．100)分子筛层析，可得到提纯样品，效率 为7．8％，凝血效价提高1280倍。 用凝胶过滤层析法对提纯样品的测定结果表明：木豆凝集素的分子量 为29000 Da。SDS—PAGE凝胶电泳检测表明：木豆凝集素是单体蛋白质。 等电聚焦电泳测得木豆凝集素等电点(p1)为5．85。用蒽酮——比色法测 定结果表明：木豆凝集素糖含量1．6％，是糖蛋白。糖结合专一性试验结果 表明：木豆凝集素可能与甘露糖基专一结合。 酸、碱稳定性试验表明：木豆凝集素在pH3．7—7．8范围内具有凝血活 性。热稳定性试验表明：木豆凝集素在50=C以下的环境温度中能保持凝血 活性。 抗蚜活性试验以人工全营养液中添加了O．5—2．09·L一含量的木豆凝集 素饲喂桃蚜，结果显示：木豆凝集素抗蚜活性在木豆基因型间具有差异性。 8501 供试的10个木豆品种中ICP8863和ICPL 0的凝集素对桃蚜的抗拒 性相对较强，而ICPL87091和ICPL87119对蚜虫的抗拒性较弱。综合蚜 虫存活日数及存活率来看，各品种木豆凝集素对桃蚜抗拒·陛大小顺序为： ICP8863ICPL8501 0 关键词： 木豆 凝集素 提纯 性质 抗蚜性 CHARACTERIZArrIoNAND PURIFICATION， ABSTRACT isthemainresourceof formanandlivestocks． Legume plantprotein Edible rankssecond the throefood legume amongtop crops，following andbefore cereals fixed rootnodules potato．Nitrogenbylegume for accounts40％oftotal fromIndian biologicalnitrogenfixation．Origin semi-contin