梨果实acc氧酶基因克隆的研究.pdfVIP

摘要 L．)植物，是我国重 要的经济树种之一，在我国有着悠久的栽培历史。为解决困扰梨生产已久的果实储藏、 保鲜问题，本研究以乙烯是影响梨果实采后衰老、腐烂的主要因素为依据，从影响梨 果实内源乙烯合成的ACC氧化酶入手，对ACC氧化酶的基因进行序列分析，以期为日 后从遗传基因上改变梨果实采后特性奠定基础，取得了以下成果： 1．建立了适合于梨果实总RNA提取的改良CTAB法。在比较热硼酸法、异硫氰酸 含多酚、多糖的特点，在传统CTAB法的基础上增加了去除多酚和多糖的步骤，取得 了良好的试验结果，获得了高质量的梨果实总RNA。 2．获得三个梨品种ACC氧化酶基因eDNA片断。以雪花梨、黄金梨、茄梨等3种 保守序列翻译成的密码子核苷酸序列，设计合成一对特异引物；经PCR扩增、克隆分 别得到三种梨果实的三条基因片断。 3．对获得的基因片断进行亚克隆，经测序获得三个梨品种的ACC氧化酶基因序 列；通序列比较得知研究获得的三个基因片断与已知其它梨品种ACC氧化酶基因的同 源性均在9896以上，证实本研究得到的基因片断为ACC氧化酶基因的一部分。 关键词：梨；RNA；ACC氧化酶基因；cDNA；克隆 The ontheACCoxidaseCloneofPearfruit Study genes Zhen Author：Dong Major：Pomologs Supervisor．ZlumgYu-xing Shen Lian-ying Abstract kind The memberofPomoideaeof one of Pyr吣，a Rosaceae，is important genus fruittreein hasa tobe economic China,whichlongtimehistory cultivated．Thereisa in ishowtostovethefruitfor’much manufacture，which difficultyproblempear longer．It hadbeen thatthe a maturativeroleinfruit mo陀 proved ethyleneplaymajor ripeningby andmore onthestudiesof oxidasewhichisthe in investigations．BasedACC keyerlzyme researchistoclonetheACCoxidase fruitsand biosynthesizing,this ofpear ethylene genes