大白菜干烧心病病过程中基因表达序列标签(est)分析.pdfVIP

中文摘要 大白菜(曰阳，，f∞∞，印卵舫L．ssp．R-幻以P埘括)原产于中国，是我国蔬菜栽 培分布最广、种植面积最大的蔬菜作物之一，也是我国的主要出口创汇蔬菜之÷。。 但是近年来大白菜“干烧心”病却严重影响了其内部质量和出口创汇。由于大白 菜资源中缺少抗性材料，以及对植物抗病机制认识的匮乏，干烧心病抗病育种一 直是蔬菜育种的重大难题。只有深入研究植物的抗病机制，才能从根本上解决这 一问题。大量研究表明此病是由于缺钙引起的生理性病害，不同品种间在抗干烧 心病特性上表现出明显的差异，选育抗干烧心病品种己引起育种家的关注。本试 验采用离体叶片溶液扦插法，研究了低钙条件下大白菜心叶的抗性及症状表现。 进一步运用抑制差减杂交(SSH)技术构建cDNA文库，应用EST技术并与生物 信息学分析技术相结合，通过阐明大白菜在干烧心病致病过程中相关基因的表达 分析，从基因表达整体水平来研究大白菜抗病机制。 离体叶片溶液扦插结果表明：筛选时EDTA-Na2的适宜浓度为2mmol／L，低 浓度的EDTA．Na2不能完全排除钙的影响；不同品种对干烧心的抗性有明显差异； 发病部位及症状与品种关系密切，不同品种干烧心的发病部位和表现症状有所不 同，主要的发病部位集中在叶缘和叶柄；叶片扦插法适合于大量材料的鉴定，此 法简单、方便、迅速，是当前干烧心鉴定方法中既经济又实用的一种鉴定方法。 抑制差减杂交研究以大白菜干烧心病高感品种B120正常供钙的叶片cDNA 构建了抑制消减文库。在获得的525条具有编码蛋白质功能的EST序列中有428 个序列功能已知，74个与推测、假想或功能未知的蛋白质具有很高的同源性。 与428条EST具有最高配准的已知功能基因分别来自13个物种。在这个抑制差 减cDNA文库中，对获得的已知基因按功能分为12类：初级代谢、能量代谢、 细胞生长分裂、转录相关、蛋白质合成、细胞物质降解、转运相关、细胞结构、 信号转导、抗病与防御、次生代谢，和其它代谢。说明干烧心病致病过程是一个 多因素影响的复杂过程，其中一些基因的表达变化可能在致病过程中起重要作 用。这些结果为进一步的干烧心病致病机理研究提供了基础与依据。 关键词：大白菜，干烧心，鉴定，抑制差减杂交，表达序列标签 ABSTRACT and cultiVated oneofmost economic extensiVelyVege妇bles， As important crops f}om originated chinese L．ssp．Pekinensis)waschI．na· cabbage(Brassicacampestris f．or inChin9se main tipbumhappened ltisalsoa export．However，the vegetable reslstant lsa for VarIety is their tipbum cabbageIimitingexportation．Breeding wellasthe of resistant as understanding difncult duetothelackof gemplasm subiect