茶儿茶素对肾炎药效及其机理研究.pdfVIP

中文摘要 本论文用动物模型和细胞模型研究了苤丛菱素对蟹瘴的药效与药珲。首先， 研究了茶儿茶素对家兔C—BSA和Masugi两种。肾炎模型的药效，及对水负荷家兔 肾功能的影响。继而，研究了茶儿茶素对小鼠免疫和炎症的作用，及对氧化应激 ， 影响。f结果分述如下： 1．茶儿茶素对家兔水负荷和。肾炎模型的作用 药效实验表明，茶儿茶素对水负荷家兔和肾炎家兔有明显的疗效。对于水 负荷家兔，茶儿茶素在大(137mg／kg)、中(68nagg)、d,(34mg／kg)翔J量下均 有显著的利尿作用，且大、小剂量间差异显著，有明显的量效关系(p0．01)，利尿 量茶儿茶素(pO．05)，峰时为0．5～1．0h。可见，大剂量茶儿茶素显著增强水负荷 家兔肾脏的滤过功能，利尿效果强于氢氯噻嗪，且药效更持久。 mg／kg)剂量条儿茶素明显降低尿蛋白、血清 mg／kg)、中(102mg／kg)、小(34 成(CIC，P0．05)：减轻’肾小球肿胀、细胞增生、血栓形成及白细胞浸润，修复 l肾小球病理改变：大、小剂量问差异显著，具有剂量．效应关系。大剂量茶儿茶 素的效果强于地塞米松。可见，茶儿茶素明显减轻’肾炎的症状。 上述结果表明茶儿茶素在肾病防治中有潜在价值。继而，根据崩fj{『关于肾炎 的发病机理，研究茶儿茶素对肾病的药理。 2．茶儿茶素刘免疫和炎症的作用 免疫机理是肾炎的始发机理，控制免疫水平是预防肾炎的重要措施。本课题 组以前的研究表明，粗儿茶素或茶提取物对免疫低下的动物(如荷瘤小鼠)，表 现增强免疫的作用；对于正常小鼠，则增强细胞免疫，而抑制体液免疫。本研究 中茶儿茶素对正常小鼠的免疫均表现抑制作用。茶儿茶素剂量为310mg／kg、 制小鼠总T细胞花环和Th花环的形成(PO．01)；大、小剂量问差异显著，存在明 显的量效关系。大剂量茶儿茶素明显抑制小鼠脾细胞产生抗体的能力。地塞米松 素显著抑制小鼠的非特异性免疫和特异性免疫； 且其抑制效果优于地塞米松。 用角叉菜胶致大鼠足跖炎性肿胀法和纸片肉芽肿法研究大、中、小剂量 赖性地抑制角叉菜胶诱发的大鼠急性炎症，大剂量茶儿茶素效果优于阿司匹林。 对于纸片所致的肉芽肿亚急性炎症，只有大剂量茶儿茶素才有抑制作用，且效果 不及地塞米松。可见，茶儿茶素显著抑制急性炎症模型，而对亚急性炎症模型的 抑制作用较弱。 3．茶儿茶素对氧化应激细胞模型的作用 3+和 c一+呈时间和剂量依赖性抑制细胞活力，三者对Veto细胞的、仁抑制浓度(IC。) 矛u 检测，发现细胞DNA和RNA凝聚浓缩，进而产生凋亡小体，出现典型的G一1亚峰 及DNA梯形条带。可见，以上氧化应激诱导细胞了凋亡，借此氧化应激细胞凋亡 模型进行以下研究。 茶儿茶素及其单体对Veto细胞和786—0细胞的毒性实验表明，低浓度促进细 大于Vero细胞。 根据IC。在非毒性浓度范围研究茶儿茶素及其单体对应激细胞凋亡模型的 但对同样应激引起的786—0细胞凋亡没有保护效果。另外，茶儿茶素对^s“诱导 亡的能力为：EGCGEcGEGC。可见，EGCG抑制作用最强。 为此，用EGCG研究茶儿茶素对应激细胞的作用机制。结果表明，EGCG町j盟 改善H20，引起的细胞异常变化，降低脂质过氧化和活性氧水平，提高抗氧化酶活 性，同时使细胞电位及钙离子浓度维持在正常水平。 EGCG能减轻As”应激Vero细胞的脂质过氧化和降低活性氧水乎，但不能保 护细胞的SOD、GS[t—Px活性，也不能抑制线粒体膜电位的下降和钙离子浓度的异 常升高，可见EGCG通过清除应激细胞自由基水平而部分抑制脂质过氧化，但不 能保护抗氧化酶的活性，最终对As3‘诱导的细胞凋亡没订保护作』口。 EGCG显著抑制Cr“引起的细胞脂质过氧化、活性氧水平升高及抗氧化酶活力 下降，同时抑制细胞线粒体膜电位的下降及细胞内钙离子的异常升高。EDI^可 增加Cr“应激细胞的活力，并与Vc有协同作用，证明络合剂对应激细胞有保护 作用。清除活性氧及络合cr的各氧化态离子而阻断活性氧的爆发性发生可能是 EGCG显著抑制Cr”诱导细胞凋亡的主要原因。 剥‘于证常细胞(Veto)和肿瘤细胞(7860)细胞，茶儿茶索也表现小活性 胞的凋亡，反而有促进细胞凋亡的作用，表明茶儿茶素对