药用植物细胞组织培养学2014,含最新研究成果。.ppt

药用植物细胞组织培养 学 时 45 理论 27 实验18 主 讲 俞年军 安徽中医药大学 药学院 生药系 2014年2月--4月 第一章 绪 论 植物细胞组织培养的概念 植物细胞组织培养的发展简史 植物细胞组织培养在药用植物生产上的应用 第一节 植物细胞组织培养相关的概念 一、植物细胞组织培养的概念 1、植物细胞组织培养（plant cell and tissue culture):是指在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养使其长成完整的植株。而研究对象为药用植物，则是药用植物细胞组织培养。 2、愈伤组织 (callus)：在植物细胞组织培养中，指在人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄璧细胞。 3、脱分化（dedifferentiation）在细胞组织培养中，一个成熟细胞或分化细胞转变成分生状态的过程，即形成愈伤组织过程 。 4、再分化（redifferentiation ）： 植物的成熟细胞经历了脱分化之后，由愈伤组织形成完整的植株，这一过程叫做再分化，或分化或再生。 5、外植体（explant）：在植物细胞组织培养中，由活体植物体上提取下来的接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称外植体。 6、细胞全能性（totipotency）：是指一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植物所必须的全部遗传信息，在一定条件下，可以发育成完整的植株。 这是德国的植物生理学家Habenlandt在1902年提出的观点。 二、植物细胞组织培养类型和过程 1、植物细胞组织培养类型 材料分类 器官培养 细胞培养 原生质体培养 愈伤组织 2、植物细胞组织培养过程 外植体（细胞） 愈伤组织 完整植株 不定器官 体细胞胚 第二节 植物细胞组织培养的发展简史 一、探索阶段（1902----1930中） 德国的植物生理学家Habenlandt(哈勃兰特）在1902年提出高等植物的器官和组织可以不断分割，直到分到单个细胞而不影响细胞增殖的观点，并设想离体细胞具有再生完整植株的潜力。 （一）德国的植物生理学家Habenlandt 的实验： 实验材料：小野芝麻和凤眼兰的栅栏组织，和虎万年青属植物的表皮细胞。 实验结果：细胞有生长，但没有长成植株，实验失败。 失败的原因：1、实验材料是已经高度分化了的细胞 2、培养基过于简单。 评价：是植物组织培养的先驱，为植物细胞组织培养奠定基础。 （二）有突破性实验 1、胚培养实验：1904年Hanning培养了萝卜和辣根菜的胚。 2、根尖培养：1922年，美国的Robbins(罗布林）和德国的kotte（科特）分别报道了培养离体的根尖获得成功。这是在无菌条件下进行器官培养的最早实验。 1、White培养基的形成和无性系的建立 1933年我国学者李继侗和沈同，进行了银杏的胚培养取得成功。 1934年美国的White用番茄根尖进行培养，获得成功植株；1937年他在培养基中加入了三种B族的维生素，使得培养获得成功；------- White培养基 实验结论：必须有适宜的培养基才能成功。 2、植物细胞培养的两个重要发现 （1）：认识了B维生素 （2）：发现了生长素 1937年美国的White培养基中加入：吡哆醇（B6）硫胺素（B1）烟酸（B5），促进了胚细胞的形成。 1939年Gauthenet(法国生物学家）在培养基中加入了 IAA，发现对形成层的组织的生长显著的增加。 1941年Overbeek在培养基中加入了椰子汁； 1944年 Skoog研究腺嘌呤或腺苷，可以促进愈伤组织的生长； 1955年Miller等发现了激动素（6-呋喃氨基嘌呤）； 1958年Steward报道在胡萝卜根韧皮部细胞培养中形成了体细胞胚，并形成了完整的植株。证明了植物细胞的全能性。 三、迅速发展阶段（1970-至今） 1、原生质体培养取得重大突破 1960年Cocking等用真菌纤维素酶分离