野生菌黄伞的培养及多糖分析研究.pdfVIP

摘 要 黄伞液体培养j二艺和菌丝体多糖提取J：艺。采用体外抗f1由基实验、血清溶血素测定实验(体液 免疫功能)以及巨噬细胞吞噬率和备噬指数实验(单核一巨噬鲴胞功能)，探讨了黄伞子实体提取多 糖A1，菌丝体提取多糖A2和纯化子实体精多糖PA的生物活性。 主要研究结果： 1．通过五种固体培养基(GⅧ培养基、综合PDA+苹果汁培养基、扬氏培养基、综合PDA培养 基以及删N培养基)对黄伞菌丝生K影响的对比实验，找出实验条件下相对较理想的培养基为综 合PDA培养基。 2．运用单因素和正交寅验方法．得fH黄伞最佳液体培养基目d方：葡萄糖2％、酵母浸粉o．8％、 300u VBl g、M92S040．04％、KH2P040．I％、K2HP040．1％。 5．5，摇床转速12晰n～ 3．得出黄伞实验范同内最佳液体培养条件：接种3块菌种，在25℃，口H 140r，Ⅱ1条件下，培养12d。 4．通过栽培研究，形成了一套黄伞高产栽培技术。 5．通过单因素试验和正交试验确定了黄伞菌丝体多糖提取最佳工艺，即菌丝体粉碎粒径为 160目、料水比1：25、提取时间2．5小时、提取温度80℃、提取1次，醇析多糖时使用无水乙醇、 乙醇加入量1：3．5、醇析12小时。 6．采用sevag法和离子交换卡手法进行了多糖纯化研究，结果表明sev醒法处理两次有较理 想的蛋白处理效果，蛋向去除率70％，但多糖同收率偏低仅有66．5％，而离，交换柱法蛋白去除 效果不佳，仅31％。 7．纸层析实验初步鉴定黄伞菌丝体多糖的组成为单一葡萄糖。但纸层析效果不佳，需做进一 步实验来确定黄伞菌丝体多糖的组成。 8．体外抗自由基实验显示，子实体提取多糖Al，莳丝体提取多糖A2和纯化子实体精多糖 PA具有较好的抗氧自由基和羟自由基作用。 9．体液免疫功能实验中子实体提取多糖A1与菌丝体提取多糖A2实验刚性；单核．巨噬细胞 功能实验中菌丝体提取多糖A2和纯化子实体精多糖PA实验阳性。又根据《保健食品检验与评价 技术规范》中判定原则：体液免疫功能和单核．巨噬细胞功能实验结果均为阳性，就可判定该受试 样品具有增强免疫力功能作用。可见菌丝体提取多糖A2具有增强免疫力功能。 关键词 黄伞 多糖 生物活性 固体培养 液体培养 Abstract tlle materi is酬ated仔om aI，which Byusing尸^晰Dr口口却∞Ⅱ(Fr)Qu61．asexperiIIlental theexu甚ction of rcscarchis aboutsolidand nlediu札and woodl柚d，“s mainly 1iquor techn0109y me of Free semm Radical，Blood of尸^Dj如加Ⅱ嘶，。J口．ByexperimentsRemoVing poIysacch州de nuid Ratioand 0f Function)，andsing Phagoc”osingExponent Hemolysin(BodyImmunity Pha90c”o bioacliVeof ext