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平邑甜茶新根细死亡及其抗凋亡基因的表达研究
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Y2303595
英文缩写符号及中英文对照表一 一
目 录
中文摘要………………………………………………………………………………………．I
英文摘要……………………………………………………………………………………．．III
1前言…………………………………………………………………………………………．1
1．1细胞程序性死亡的分类及其特征………………………………………………………．．1
1．2细胞程序性死亡发生的调控……………………………………………………………。2
1．2．1
Caspase-细胞死亡执行者……………………………………………………………。2
1．2．2
Bcl．2家族：细胞死亡的调节阀………………………………………………………．3
1．3细胞程序性死亡相关基因及其功能……………………………………………………一4
1．3．1
BI．1的结构与功能………………………………………………………………………4
1．3．2
HSP70的结构与功能……………………………………………………………………4
1．3．3
BAG的结构与功能……………………………………………………………………．．5
1．4本研究目的和意义………………………………………………………………………。6
2材料与方法…………………………………………………………………………………．7
2．1试验材料…………………………………………………………………………………．．7
2．1．1{式材…………………………………………………………………………………………………………………．．7
2．1．2菌株与质粒………………………………………………………………………………7
2．1．3酶及生化试剂……………………………………………………………………………7
2．1．4
PCR引物……………………………………………………………………………………………7
2．2试验处理…………………………………………………………………………………。9
2．2．1不同品种、组织苹果砧木处理…………………………………………………………9
2．2．2不同生长时期处理………………………………………………………………………9
2．2．3高温胁迫处理……………………………………………………………………………9
2．2．4正常生长管理处理………………………………………………………………………9
2．2．5
2，4．D处理………………………………………………………………………………．9
2．2．6干湿交替处理……………………………………………………………………………9
2．3试验方法…………………………………………………………………………………．．9
2．3．1平邑甜茶总RNA的提取………………………………………………………………9
2．3．2
2．3．3腓』序列的扩增……………………………………………………………………10
2．3．3．1
PCR扩增MhBI-1保守序列…………………………………………………………10
2．3．3．2 1
3-RACE扩增3’端序列……………………………………………………………1
2．3．3．3琼脂糖凝胶电泳……………………………………………………………………．．11
2．3．3．4测序分析………………………………………………………………………………11
2．3．4
DNA片段与克隆载体的连接…………………………………………………………12
2．3．5制备和转化大肠杆菌感受态细胞……………………………………………………。12
2．3．5．1制备大肠杆菌感受态细胞…………………………………………………………．．12
2．3．5．2大肠杆菌感受态细胞的转化………………………………………………………．．12
2．3．6质粒DNA的提取……………………………………………………………………．．12
2．3．7凝胶电泳中DNA片段的回收………………………………………………………．
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