强血管生成促进sdy-08的促组织修复作用.pdfVIP

强血管生成促进剂SDY-08的促组织修复作用 摘要 背景与目的： 主的血管系统的过程。这一过程包括毛细血管内皮细胞的增殖和迁移。在正常生理 状态下，人体血管内皮细胞的倍增时间约为1年。人体只有在较特殊的环境下才会 出现血管生成，例如创伤愈合，胚胎发生和女性经期等。 组织修复的关键环节之一为血管新生，血管新生好坏直接影响组织修复的速 度，因此血管再生调控一直是组织修复研究关注的焦点之一。自从70年代初，美国 哈佛医学院的FolkmanJ博士【27】最早预言了用促进血管生成即“治疗性血管生成”的 方法治疗缺血性疾病的前景后，特别是近20年来，人们对血管生成因子，如血管内 endothelial 皮细胞生长因子(vascular growth 因子(fibroblast growth Vasostatin等)进行了广泛而深入的研究，提出了内源性血管生成因子与血管生成抑 制因子间的“平衡与失衡”理论。在众多血管生成因子中VEGF是最受关注的，它在 组织修复过程中具有广泛的调节作用。通过药物的干预或促进VEGF的表达与释放 从而达到治疗目的，已经成为组织修复研究中受到人们广泛关注的入路。 海洋生物体内含有众多的海洋生物活性物质，从海洋生物活性物质筛选新药及 其先导体，是新药研究和开发的重要途径。SDY-08是本实验室从海洋生物中分离 出来的一种活性成分，我们通过以下实验检测其对血管生成和创伤愈合的影响并初 步探讨了其作用机理。 方法： umbilicalveinendothelial 1．MTT法检测SDY-08对人脐静脉血管内皮细胞(human cells，HUVECs)生长的影响。 2．建立鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryochorioaUantoic 测SDY-08对CAM血管生成的影响。 3． 建立小鼠皮肤创伤模型，检测SDY．08对小鼠创伤愈合的影响。 4． 免疫组化法检测SDY．08对创伤周围组织血管内皮细胞VEGF表达的影响。 5． 蛋白免疫印迹法检测SDY-08对HUVECs细胞VEGF表达的影响。 结果： 值诱导率(Promotion 率分别为28．1％、115．6％和81．4％。 tl 2．SDY-08能够诱导CAM血管的生成，并与剂量相关。SDY-08(30g／胚／天×3)、 u la SDY-08(60g／胚／天X3)、SDY-08(120g／胚／天X3)、SDY-08对CAM血管 生成的诱导率分别为27．9、47．4、和70．9％。 3．SDY-08显著促进小鼠创伤愈合。高剂量组第8天12只小鼠中有4只创伤愈合， 伤全部愈合，且愈合的创面平滑，而对照组创面长期结痂，第11天只有6只 d， 愈合，第12天才全部愈合；SDY-08高剂量组创面愈合平均时间为9．1+1．3 较对照组11．2+0．92d提前2天，差异非常明显。 4． SDY-08上调小鼠创伤周围组织VEGF的表达。实验组的小鼠创伤周围组织血管 内皮细胞胞浆和胞膜VEGF表达呈阳性或强阳性，呈深棕黄色颗粒状，局灶性 或弥漫性分布，而对照组大多数细胞VEGF表达呈弱阳性。 5．SDY-08上调HUVECs细胞VEGF的表达，并与剂量呈正相关。 结论： 1．SDY-08能促进HUVECs细胞的生长，其作用效果与剂量成正相关。 2．SDY-08能诱导CAM的血管生成，并与剂量成正相关。 3．SDY．08具有促进伤口愈合的作用。 4．SDY-08能够增强创伤组织血管内皮细胞VEGF的表达。 5．SDY-08能上调HUVECs内VEGF的表达。 调血管内皮细胞内VEGF的表达密切相关。 关键词：SDY-08，血管生成，创伤愈合，HUVECs，VEGF Effectsof