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葡萄果实中ack1蛋白激酶的基因克隆和功能的初步鉴定
中文摘要
本实验以巨峰葡萄(HtisviniferaX
orotein
kin船e，CDPK)
ACPKI(△BA-stimulatedgaleium．．dependentk_inaseLACPKI)的测序结果设计合成简并引
grotein
钫利用RT-PCR(reverse chain
transeription-l!olymerase
ofeDNA
ends)技术克隆得到编码此蛋白的cDNA全长序列。eDNA全长为1714
bp，在GenBank
的注册号为AY394009。此核苷酸序列具有完整的开放阅读框，编码区长1491
bp。经相关软件分
(Solanwn lllaxseed)，拟
南芥(Arabidopsisthaliana)CPKl2，水稻(Oryza
ACPKl在葡萄基因组中可能有两个拷贝。
linkedimmuno§orbent§ssay，ELISA)、抗原滴度检测(Protein
制得韵抗体血清对ACPKI具良好的特异性和较高的检测灵敏度。
经实验证实ACPKI在葡萄果肉和种子中特异表达，并呈现不同发育时期的表达差异。不同
时期的表达差异与内源ABA浓度呈正相关。应用外源ABA温育葡萄果实圆片的实验体系证实，
ABA在转录和翻译水平激活ACPKl，且激活效应具温育时间和ABA剂量的依赖性。
种子萌发后期和幼苗生长对外源ABA处理呈现脱敏现象。这些结果初步表明ACPKI参与了植物
的ABA信号转导过程，AtCPKI
l和AtCPK4可能是植物ABA信号通路中的新组分。
Abstract
Basedon ACPKl 58一kDaABA-stimulatedCDPKfromthe
kinase，a
sequencingof删ficd protein
of labruscaL．cv
grape vinifera×l／iris
meseoearpberries(Htis Kyoho)，Wedesigneddegenerate
that totwoofthematched ofthe RT-PCRand
primerscorrespond sequencesprotein
kinase．Using
RACE eDNAclone furACPKlwasobtainedand inGenBank
method，a putativelycoding registered
number isa all
clonewith
(accessionAY394009)．ACPKl
full—length openreading
nucleotidesand a acid
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