利用sry基因微卫星标记鉴定反刍动物性别的研究.pdfVIP

摘要 本实验以性别鉴定为研究内容，旨在建立性别鉴定程序，提高性别鉴定的准确率， 使性别鉴定技术达到使用化的应用阶段，实现性别控制。实验以反刍动物中的凉山半 一次DNA扩增同时提供性别鉴定和基因分型的信息。 实验结果表明： 所设计SRY基因的引物具有高度特异性，是性别鉴定的主要依 验证所鉴定的雄性个体。结论：在所有的被检个体中，能同时扩增出Y染色体上的SRY、 两标记基因型出现杂合子的现象，则说明这些被检个体为性染色体发育异常的雄性 (XXY)，不能留作种用，本实验所用的雄性实验动物没有出现这种异常情况：被检 个体中只有Y染色体上MCMl 因型对雌性个体的性别判断无影响。MCMl58、MAF45两标记基因型不影响个体的性 别鉴定结果。 过去扩增的X—Y特异性片段多为缺乏多态-眭的片段，不能提供其他个体差异的信 息。欧实验选择SRY基因以及X染色体和Y染色体的多个多态位点进行复合扩增可 以浼是一种有意义的尝试，利用浚项研究建立的方法既可进行性别鉴定，又可用来同 一认定，与传统的性别检查有着本质的区别，这在今后的体育竞赛、衾融保险等领域 具有广阔的应用前景。另外，该方法还可用于动物肉食制品的监测、性别分化和性发 育异常、疾病筛选、法医学、考古学以及各类刑事案件串、并案的侦破等领域。 关键词：SRY基因性别决定微卫星标记 性别鉴定 一、文献综述 1．前言 动物的性别鉴定是生物学领域的一项重大课题，同时也是胚胎工程的一个重要环 节，在畜牧业生产中具有特殊意义。这是因为雌雄两性个体在生长速度和生产性能等方 面存在着显著的差异，因此根据，土产需要，人为地鉴定和控制动物性别．对于家畜育种、 实际生产及防止连锁性遗传疾病具有非常重要的意义，在畜牧生产中具有商业价值和科 学研究价值。 1990年性别决定基因的发现是哺乳动物性别决定这个研究领域的一项重大突破， c}lromosome，在小鼠等其他动物用Sry表示) regionofY 近年来SRY(Sex—determining 基因的定位使性别决定机理的研究又取得突破性进展。随着性别决定机理研究的深入， 性别鉴定的方法也得到同步发展，尤其是PCR技术和微卫星标记的应用，使性别鉴定 技术达到使用化的应用阶段。 2．性别决定基因 2．ISRY基因的发现及证实 哺乳动物的Y染色体在性别分化中起决定性作用，几十年来，人们一直在寻找和 均被以后的研究所否定。直到20世纪90年代，随着分子生物学和发育生物学及其它相 关学科的发展，人们从本质上对性别决定有了一些较为清楚的理解，对TDF的认识才 获得突傲性进展。 2．1．1 SRY基因的定位历程 1959年研究者首次证明Y染色体是小鼠和人类的雄性决定因子。经过几年的探索， 于1966年把研究的焦点集中在Y染色体短臂上。但在以后的20年罩，没有重大突破。 区段建立了Y染色体缺失定位图，并认为TDF位于Y染色体上的第一区段内，邻近拟 色体和一条常染色体之间发生转位的女性研究发现：该男性易位的Y染色体序列，除 Y，ZFY)，并认为ZFY可能就是TDF 个高度保守的基因——锌指基因Y(Zinc．Finger 基因，但是这种结论很快就被否定了。因为1989年Palmer发现3个XX男性患者中缺 A1仍然存在，3个XX型人确实为男性，这表明ZFY不是TDF，睾丸决 失ZFY，而l 定基因可能在IAl上。对Xx型男性的分析研究，使TDF基因的搜索范围缩小到区间 1A1亚区拟常染色体相邻的60Kb内，由于更多DNA标记物的存在则使研究区域缩小 出一个基因，该基因与性别决定有关，称为性别决定基因，因为它位于Y染色体上，所 SRY基因的发现是生命 以叫SRY。同时在小鼠中也发现类似的同源序列，称为Sry。 科学的一项重大突破，被评为1990年世界十大科技成就之一。 一 一 一 印 № ～ r_--．_-_