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抗真菌肽基因ap的克隆和植物表达载体的构建及牧草遗传转化的研究
摘要
囊菌藏害是蔽露l牧摹生长的主簧嚣素之一，每年盘予囊莹藏骞绘敬荤摹瑟草坪擎畿
来了很大的经济损失。造成牧草产髓下降，品质变劣：草坪草褪色、黄化甚至枯死，
影响草坪质整降低鄹用年限。传统的对真鹜防治方法采用藏雳杀菡黼和农蓊，这会带
来环境的污染，危簿人类的身体健康。面基因工程技术的兴起，为我们提供了新的研
究方法。
计PER扩增特异，克隆得到抗真菌肽(antifungalprotein)基因，与pUC。一Teasy
DH5
vector连绥，转纯￡colig，褥蚕重缝子pUC涕FP，经酶甥瑟露列分褫蕤定，改片
致，有100．00％的闻源性，将其序列翻译成蛋自没有终止予的出蕊，表嚼可懿进行原
核液这和檬物载体转化实验。
将此抗真菌肽基因克隧到E
AFP戆ll。99
OD，逐疆该AFP基霞农摄棱表达系统中可以正露表达。
从水稻叶片中提取基因组DNA，设计PCR扩增特异引物，克隆单子叶特异表达启动
DH5
vector连接，转纯最cotig，褥弱燕缝子
予Actinl整因，与pUo一羊easy
与已发表的Actinl碱基序列有99．60％的同源性。
捣建Aetinl囊动子基豳驱动的AFP蘩因单子时植物表达载体，进行早熟禾的遗传
转化：将AFP基因插入载体pBll21构建了双子叶植物表达载体，进行曹稽的遗传转
纯，缛到卡那霉紊抗性寝步薅选熬转化蓥。为深入并聂荤媳抗奏菠转基因辑究羹鬻了
基础。
关键词：荫蓿抗舆菌肽基因克隧原核表达植物发达载体构建遗传转化
AFPGeneandConstructionofPlant
of
Cloning
for
Vector transformation
Expressionforagegenetic
Abstract
ofthemainfactorsthatconstrainthe of
diseaseisone
Fungal developmentgrass
not reducethe of also
to disease
industry．As only yieldforage，but
stockbreeding．fungal
the would thehealthofthelivestock．Forturf
effect
quality．Furthermore，itdamage grass，
oflawnandwitherit．So
diseasecanloseits its time
color，decrease
fungal using fungal
diseasecouldleadtolotsofeconomicallosses thetraditionalmeasuresto
everyyear．But
and
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