抗鹅γ-干扰素克隆抗体制备及鉴定.pdfVIP

摘要 摘要 抗肿瘤活性外，免疫调节作用是其主要的生物学功能，如：激活巨噬细胞、上调MHCI。II 类分子表达水平、促进抗原提呈，诱导Th细胞的分化等，在机体针对肿瘤及多种胞内病原 体感染等疾病的细胞免疫中发挥重要的作用，是体现机体免疫功能的一项重要指标。而抗 IFN吖特异性单克隆抗体(McAb)在评价机体细胞免疫功能方面具有重要的应用价值。本研究 行鉴定，为进一步研究鹅IFN吖的生物功能及鹅细胞免疫应答提供物质基础。 III和EcoRI双酶切后， 本研究将pcDNA3．1载体和pMDl8-T-mGolFNq质粒分别经Hind 将其克隆至真核表达载体pcDNA3．1的相应位点，构建了鹅IFN-5基因的真核重组表达质粒 pcDNA3．1一IFN吖。经酶切鉴定，结果表明所构建的重组质粒为鹅IFN吖基因特异性真核表达 BALB／c鼠，采用淋巴细胞杂交瘤技术，获得3株可稳定分泌抗鹅IFN吖McAb的杂交瘤细胞 定结果表明，腹水效价分别为1：8000，1：16000和l：28000，且IHll相对亲和力大于IE8 位点，1E8与1H1l和2D6分泌的McAb识别不同的抗原位点。经Westernblot检测，3株 IFN-y的特异性McAb。 关键词：鹅P干扰素；McAb Abstract ofMonoclonalAntibodiesthe Development Against Goose Interferon-·gamma Abstract CD4十Thl cellsandnaturalkiller a IFN吖，producedmainlyby cells，CD8+T cells，plays criticalrolein immune immune includes modulation．Itsmodulation anti—virus，anti—tumor,and activating the ofMHCclassI andclassIImolecules， maerophages，upregulatingexpression the of Thcell anddifferentiation．Thelevel promptingpresentationantigens，andinducinggrowth of an indextothecellular antibodies IFN吖isimportant valuablein and thecellular (McAbs)specificallyagainstIFN吖arevery detecting evaluating immunestatus．Inthis BALB／cmiceto study，recombinantplasmidpcDNA3．1-IFN-5immunized celllines McAbs results aconcrete generatehybridoma secreting againstGolFN-y．T