夏枯草黄酮的提、纯化及其生物活性研究.pdfVIP

摘要 摘要 夏枯草为唇形科夏枯草属植物夏枯草的干燥成熟果穗，因“此草夏至后即 枯”得名，具有消肿止痛、清火明目、散结等功效，是我国传统的中草药。夏 枯草中的主要活性成分为黄酮类化合物、甾醇类及其苷类化合物、香豆素化合 物、三萜及其苷类化合物、挥发油、苯丙素类化合物、有机酸等。 到目前为止，对夏枯草中的黄酮类化合物提取、分离纯化以及产品的生物 活性未见有系统的报道，影响了夏枯草活性成分的开发和利用。 本文对夏枯草中的黄酮化合物进行了较为系统的研究，旨在充分利用这一 丰富的药材资源，为研究开发我国具有自主知识产权的新药提供科学的依据。 主要研究内容及实验结果如下： 1．对夏枯草的常规成分进行了分析。结果如下(g／loog，干重)：总灰分含 量为12．55，蛋白质含量为9．77，总糖含量为10．21，还原糖含量为1．32，脂肪 含量为4．91，总多酚含量为2．78。采用火焰原子吸收法测定了夏枯草中的Mn、 Cu、Mg、Fe、Ca、Zn、Cd等元素。结果表明，夏枯草中含有较为丰富的微量 元素。 2．通过3种不同的提取方法(溶剂回流法、超声辅助提取法、微波辅助提 取法)的比较，同时结合响应曲面的优化对夏枯草中的黄酮化合物进行提取。 结果发现，溶剂回流法优于其他两种提取方法，其最佳提取条件为：乙醇体积 分数为20％、提取温度为97-8℃、提取时间为3．2h、 液固比40：1，在此条件 下夏枯草黄酮得率为5．72％。 3．通过静态吸附、静态解吸及吸附动力学研究，对D101、AB_8、NKA-9 和NKA-114种大孔吸附树脂进行筛选，发现AB一8树脂对夏枯草黄酮有较好的 吸附和解析能力，同时对AB_8树脂分离纯化夏枯草中总黄酮的工艺条件进行了 优化。结果表明，弱极性树脂AB一8的吸附率为90．29％，解吸率为81．29％，是 性能良好的总黄酮吸附剂，其最佳条件为：上样浓度3．732 mg／mL，pfl为5左 右，上样流速2mL／min，沈脱液乙醇体积分数40％，解吸液体积5BV，解吸流 速1．5 mL／min。经AB一8大孑L树脂纯化后，夏枯草乙醇提取物中总黄酮的纯度由 46．25％提高到81．58％。 ： 4。通过测定纯化后的夏枯草黄酮对DPPH和羟基自由基的清除能力、总还 摘要 原能力、总抗氧化能力、p胡萝卜素的漂白实验来研究其抗氧化能力。结果表 明，纯化后的夏枯草黄酮具有良好的抗氧化能力，可作为一种新型的天然抗氧 化剂。 5．选取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉等5 种菌种，用纯化后的的夏枯草黄酮进行体外抑菌实验，对最低抑菌浓度、最低 致死浓度和抑菌圈进行测定。实验结果表明，夏枯草黄酮对细菌有较强的抑制 作用，而对于霉菌则效果不明显。夏枯草黄酮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、 枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度分别为1．5625 mg／mL、1．5625mg／mL、3．125 mg／mL，最低致死浓度分别为3．125mg／mL、3．125mg／mL、6．25mg／mL。因此， 夏枯草黄酮可以作为一种理想的抑菌添加剂使用。 关键词：夏枯草：营养成分：微量元素：黄酮类化合物；提取；纯化；生物活 性；抗氧化活性；抑菌活性。 ABSTRACT ABSTRACT Prunella the Limais dry ofPrunella Linnwhich vulgaris spike vulgaris belongs toself-heal namecomesthe category．Its from willdie after