野生花生含油量ssr标记的关联分析.pdf

摘 要 花生(Arachis L．)是我国重要的油料作物之一，高油花生品种的培育已经成为我国 hypogara 花生育种的重要目标。但是，我国生产上应用的花生品种含油最不高，主要原因是栽培种资源中 高油种质匮乏，对含油景的遗传机制研究较少，含油量受环境影响大致使育种中根据表型选择困 难。国内外许多研究表明，野生花生拥有某些栽培种花生不具备的优良性状，如对叶部病害和病 毒病的高度抗性甚至免疫。但是，国内外对野生花生的含油量研究较少。冈此．有必要鉴定野生 花生的含油鼍，发掘稳定高油的野生花生种质，探索利用野生花生资源来拓宽栽培种花生含油量 的遗传基础，建立含油量的分子标记。关联分析和连锁分析是目前研究目标性状分子标记的主要 方法。以自然群体为材料，通过基于连锁不平衡的关联分析方法，可以同时分析多个材料的目标 性状，还可以同时对多个性状进行分析，特别适合于数量性状如含油量的分析。国内外许多研究 表明，野生花生不同种问存在同源性，相互之间存在可交配性。因此，可以利用野生花生的自然 群体进行关联分析。本研究以国家野生花生种质圃保存的野生花生为材料，多年多重复检测含油 量，同时用SSR技术对这些野生花生材料进行多态性分析，应用关联分析方法，建立含油量的分 子标记。主要研究结果如下： 倍体)含油量及脂肪酸成分进行多年重复鉴定，明确了野生花生的含油量及其脂肪酸组成的遗传 变异。研究结果表明，野牛花生含油量的最低值、最高值和平均值分别为53．98％、63．74％和 56．76％，均高于栽培种花生资源的对应值，棕榈酸、硬脂酸、花生酸和花生烯酸含量与栽培种相 似，亚油酸和山嵛酸含量稍高于栽培种，而油酸含量稍低于栽培种。发掘出高油种质(含油量≥ 油最达63．74％的种质A．appressipila是目前所发现的野生花生资源中含油量最高的种质。 2．以20份高油野生花生为材料，用46对扩增条带清晰且多态性丰富的SSR引物对其基因 组扩增，共扩增出425条多态性条带。每对引物扩增获得的条带数为2．21，平均9条。其中引物 强，能将20份材料中的18份区分开。5组三引物组合能将20份材料完全区分，包括 2E6／PM403／189、 2E6／PM403／9A7、 2E6／PM403／10HlA、 、 2E6／PM403／PM201 料的国家统一编号、引物名称和分子数据建立了20份野生花生高油种质DNA指纹身份数据库。 3．以79份二倍体野生花生为材料，从346对引物中筛选出87对扩增条带清晰、多态性丰富 且覆盖野生花生A基因组和B基因组全部连锁群的SSR引物对其基因组DNA进行扩增，87对 亲缘系数。结果表明，所涉及的野生花生分为两个亚群，两两材料间kinship0．2的情况约占75％， 表明79份野生花生材料之间亲缘关系较远，反映’r野生花生资源的广泛性及多样性。 4．利用TASSEL2．1软件进行关联分析，共检测到65个与目标性状相关的SSR标记位点。 其中，7个位点与含油量相关，表型变异解释率变异范围0．0218-0．0468，其中贡献率最高的位点 个位点与亚油酸相关联，表型变异解释率变异范围0．0215．0．0609，贡献率最高的位点为 献率最高的位点为POCR39．140。8个位点与二十四碳烷酸相关联，表型变异解释率变异范围 0．0063．0．0609，平均为0．0303。 5．通过等位变异效应分析，发现与含油量关联位点的等位变异中，有5个等位变异具有增效 1 个减效等位变异，XY．95．175增效效应最大(+1．3)，XY．38．166和4BI1-200的减效效应最大 )(Y．27．5减效效应最大(．1．22)。 关键词：野生花生，SSR，指纹身份证，含油量，关联分析 Ⅱ Abstract oilseedin ofvarietieswith Peanut(ArachishypogaraL．)isimportantcropChina．Deve