微囊藻毒素的厌降解及兼性厌氧降解菌的分离.pdfVIP

摘要 水中的迁移转化规律已引起日益重视。微生物降解过程被认为是水体中MC归 趋的主要途径之一，尽管国内外学者对MC的微生物降解方面进行了大量研究， 但主要集中于MC的好氧微生物降解方面。由于自然水体中普遍存在着厌氧环 境，那么厌氧降解过程很可能对MC的迁移转化产生重要影响，但是目前对于 MC在厌氧条件下的降解过程却未见报道，也没有分离出MC兼性厌氧降解菌。 因此本文首先考察了MCLR在厌氧条件下的降解过程，然后从滇池沉积物中分 离出2株MCLR兼性厌氧降解菌，并对其中的1株进行了降解能力研究以及初 步鉴定。具体内容及结果如下： 1．滇池沉积物菌群对微囊藻毒素的厌氧生物降解 通过室内模拟实验，研究了滇池沉积物中混合菌群在厌氧条件下对MCLR 的降解能力，并考察了环境因素和外加营养源对该过程的影响。结果表明，厌 2 氧条件下MCLRd内从5 mg／L迅速降解到检测限以下，说明该菌群在厌氧条件 下对MCLR具有较强的降解能力，并且可以利用MCLR作为唯一氮源。在实验温 度范围内，MCLR的降解速率随着温度的升高而增大。酸性条件下MCLR的厌氧 11．0)条件下降解速率没有显著差异。单独添加葡萄糖可以产生酸性物质而使体 系的pH下降，从而抑制MCLR的降解，但是同时添加硝酸盐可以消除这一影响。 单独添加硝酸盐对MCLR的厌氧降解也有显著的抑制作用，说明硝酸根在这一过 程中未被MCLR厌氧降解菌用作最终电子受体。这些结果表明，厌氧降解可能是 沉积物中MCLR转化的另一重要途径，该过程在MCLR污染治理方面具有潜在的 应用价值。 2．MCLR兼性厌氧降解菌的分离纯化及降解能力研究 通过三层平板分离法，从长期遭受蓝藻水华污染的滇池沉积物中分离得到2 株能够以MCLR作为氮源生长的兼性厌氧降解菌，其中菌株4W20在缺氧条件 60％，因此选取降解能力较强的菌株4W20进行后续实验。 与缺氧条件相比，好氧条件下菌株4W20在6d内对MCLR的降解率达 100％，而厌氧条件下6d内对MCLR的降解率为66．7％。说明该菌株在不同溶 解氧条件下仍具有很强的降解能力，且溶解氧含量升高，菌株对MCLR的降解 能力增强。 3．MCLR兼性厌氧降解菌的初步鉴定和保存 通过考察MCLR兼性厌氧降解菌的形态特征和生理生化特性对菌株进行初 步鉴定。在好氧条件下菌株4W20的菌落形态为圆形，乳白色(偏淡黄色)，直 径约1～1．5mm，边缘紧缩，表面光滑、湿润，半透明。在缺氧条件下生长的过 程中伴随着菌落形态的变化，生长初期均为圆形，乳白色，直径0．5～O．8mm，边 缘紧缩。生长末期为近似圆形，乳白色，直径1．5mm，边缘出现小锯齿状。该 降解菌为不运动的革兰氏阴性杆菌，属于兼性厌氧菌，大小为O．5lxmx2pm， 无荚膜，无芽孢。通过生理生化鉴定试验可知，该降解菌均能利用葡萄糖和甘 露糖产酸，MR、VP反应和尿素酶检测呈阳性，能利用丙二酸盐，具有过氧化 氢酶和半乳糖苷酶，不水解淀粉和纤维素，明胶液化和苯丙氨酸脱氢酶呈阴性， 不产生硫化氢，不能在氰化钾培养基上生长。通过以上形态学和生理生化特性， 初步鉴定MCLR兼性厌氧降解菌4W20属于水拉恩氏菌属(Rahnellaaquatilis)。 通过对比液体石蜡保存法、甘油．生理盐水保存法、低温甘油保存法、甘油 菌液对半保存法和蒸馏水保存法这5种方法的优劣发现，甘油菌液对半保存法 既能使菌株保持原始性状，又能保证菌株具有很强的降解活性。所以最终选择 甘油菌液对半保存法作为MCLR兼性厌氧降解菌的保存方法。 关键词：微囊藻毒素；厌氧生物降解；兼性厌氧降解菌 II Abstract Becauseof has microcystinpotential and hepatotoxicity,the transport transformationof in water microcystindrinkingha