转bt cryah基因玉米对蜜蜂的安全性研究.pdfVIP

摘要 蜜蜂是公认的有益昆虫，具有经济和生态重要性，既能提供有益的蜂产品又能为植物授粉。 对提高农作物产量、改善产品品质和维持生态平衡具有十分重要的作用。近年来世界范围内蜜蜂 大量减少，杀虫剂中毒是导致蜂群下降的主要原因之一。转基因抗虫植物的发展，为害虫防治提 供了一条新思路，减少了杀虫剂的使用。新型杀虫蛋白基因crylAh基因是中国农业科学院植物保 护研究所从Bt菌株BT8中鉴定克隆的，其编码蛋白对鳞翅目害虫具有强毒力，尤其对亚洲玉米螟 的应用前景。因此，开展转crylAh基因玉米对蜜蜂的安全性研究很有必要。 本文从农业生态系统的角度出发通过毒蛋白的实验室测验、Bt玉米花粉饲喂蜂群幼虫试验和 更接近实际农业生态条件的大田网室试验，测定转BtcrylAh基因玉米对蜜蜂的直接影响；并测 定了CrylAh毒素对蜜蜂敌害大蜡螟的毒性以及螨害蜜蜂对毒素敏感性的改变，并且以一些化学 杀虫剂为阳性对照研究其对蜜蜂的致死亚致死效应。具体结果如下： 1、在实验室将接近Bt玉米花粉中表达量浓度1 ng／ml、10ng／n帅不现实的高浓度10000ng／ml CrylAh毒素混入糖水中饲喂蜜蜂工蜂，测定CrylAh毒素对意大利蜜蜂和中华蜜蜂存活、寿命、 花粉取食量、王浆腺重量和学习行为的影响。结果显示三种浓度CrylAh毒素对意大利蜜蜂和中华 蜜蜂工蜂的存活、寿命、花粉取食量和王浆腺重量未见不利影响。取食含10000ng／nflCrylAh毒 素糖水的意大利蜜蜂对30％蔗糖水的PER响应水平较对照低，而且对学习行为有不利影响。 2、通过解剖工蜂大脑，培养获得大量分离的蜜蜂脑神经细胞，利用膜片钳技术全细胞记录 (3-Stain)条件下对蜜蜂脑神经元的阈电流没有显著改变，表明对脑神经细胞兴奋性没有显著影 响。 3、给意大利蜜蜂和中华蜜蜂蜂群中4击日龄幼虫饲喂转基因玉米花粉、常规玉米花粉、杂花 粉、以及哺育蜂饲喂，转基因玉米花粉对封盖率、出房率、发育成功率和发育历期没有显著影响， 表明转crylAh基因玉米花粉对意大利蜜蜂和中华蜜蜂幼虫的存活和发育没有不良影响。以联苯 菊酯和溴氰菊酯作为阳性对照，通过饲喂的方式测定了这两种杀虫剂对蜜蜂的亚致死效应，结果 表明联苯菊酯和溴氰菊酯显著降低了发育成功率，延长了发育历期。 4、通过大田网室试验测定在实际田问条件下转crylAh基因玉米对意大利蜜蜂的风险。意大 利蜜蜂蜂群在扬花期分别放入种植转基因玉米和常规玉米的网室中，测定对蜂群存活、发育和行 为的影响。结果显示，Bt玉米对发育历期、工蜂存活、蜜蜂体重、王浆腺重量、群势、采集行为 和嗅觉学习行为均无不利影响。 5、通过饲喂含毒素糖水的方法在实验室探讨YCrylAh毒素对螨害蜜蜂的影响。1ng／ml、10 ng／ml和10000 ng／ml三种浓度CrylAh毒素对螨害蜜蜂的存活没有显著影响。与此同时开展了 CrylAh毒素对蜜蜂敌害大蜡螟(GalleriamelloneUa)的致死效应研究。结果表明大蜡螟幼虫取食含 措施。 关键词：意大利蜜蜂，中华蜜蜂，crylAh基因，转基因玉米，风险评估 Abstract The is asabeneficialinsectof scientific honeybeewidelyrecognized agronomic，ecological。and valuable jelly，propolis，andWaX) importance．Itproducescommerciallyproducts(honey，pollen，royal of disorderin a rolein isoneofcauses and honeybeecolony playsmajor croppollination．Insectici