HMC毒素诱导玉米同核C、N细胞质细胞凋亡的荧光显微观察.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(9): 1823-1829 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.09.008 HMC 毒素诱导玉米同核C、N 细胞质细胞凋亡的荧光显微观察 1 1,2 3 4 1 1 2 1 5 马春红 ，李秀丽 ，董文琦 ，张红心 ，李运朝 ，崔四平 ,王立安 ，贾银锁 ，戴志刚 1 2 3 （河北省农林科学院遗传生理研究所，石家庄 050051 ；河北师范大学生命科学学院，石家庄 050016 ；河北省农林科学院科技处，石家庄 050051； 4 5 唐山师范学院，河北唐山 063000； 湖北省土壤肥料工作站，武汉 430064 ） 摘要：【目的】研究玉米小斑病菌C 小种毒素（HMC-toxin）诱导同核异质体玉米的离体根冠细胞发生凋亡的 差异性及凋亡规律。【方法】采用吖啶橙（AO）与溴化乙啶（EB）荧光复染以及Hoechst 33258 荧光染色的方法检 测。【结果】HMC 毒素诱导根冠细胞发生凋亡，出现凋亡小体与染色体边集形态特征。在3 种毒素浓度、3 种处理 -1 时间下，Mo17-C 的根冠细胞死亡率均高于Mo17-N。采用AO 与EB 复染方法，在150 μg·mL HMC 毒素处理7 h 时， -1 Mo17-C 细胞凋亡率达最高值，为68.7%，而Mo17-N 仅为29%；经Hoechst 33258 染色后，在150 μg·mL HMC 毒素 处理下，Mo17-C 也于7 h 时达最大凋亡率，为57.3%，而Mo17-N 为27.7%。【结论】在毒素“伤害”细胞致死过 程中，C 细胞质的细胞死亡率远高于N 细胞质；在“诱导”细胞凋亡程序中，C 细胞质的细胞凋亡率也远高于N 细 胞质的。凋亡率随诱导浓度和诱导时间的增加而增加。AO、EB 复染与Hoechst 33258 染色相比，两者细胞凋亡率 接近，准确度均高，图像清晰，且费用相当，但前者可以区分早期和晚期凋亡细胞而后者不能区分。 关键词：玉米小斑病菌C 小种；毒素；细胞凋亡；Hoechst 33258；吖啶橙；溴化乙啶 Detection of Apoptosis in Homocaryon with C and N Cytoplasm of Maize Induced by Helminthosporium maydis Race C (HMC) Toxin 1 1,2 3 4 1 1 MA Chun-hong , LI Xiu-li , DONG Wen-qi , ZHANG Hong-xin , LI Yun-chao , CUI Si