苯丙氨酸与UV-C对苦荞芦丁含量影响及相关基因表达分析.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(23):4772-4780 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.002 苯丙氨酸与UV-C 对苦荞芦丁含量影响 及相关基因表达分析 孙朝霞，侯思宇，杨武德 （山西农业大学旱作农业工程研究所，山西太谷 030801 ） 摘要：【目的】克隆与苦荞芦丁生物合成相关基因序列，探讨外源前体物质及UV-C辐射条件下芦丁含量及基 因表达水平的影响，为分子选育高芦丁含量荞麦品种奠定基础。【方法】基于简并引物结合3′RACE的方法，克隆苦 荞芦丁合成途径相关基因；高效液相色谱（HPLC）测定持续添加外源苯丙氨酸（L-phenylalanine，Phe）前体（1、 2、4 mg·L-1 ）1—5 d和辐射时间（1、3、5、7 h）UV-C处理条件下叶片芦丁含量的变化，qRT-PCR分析相关基因表 达水平。【结果】Phe （4 mg·L-1 -1 -1 ）处理1 d，芦丁含量（26.15 mg·gFW ）为未处理对照（12.55 mg·gFW ）的2 倍； UV-C辐射3 h，芦丁含量（17.36 mg·gFW-1）明显高于对照；克隆到3 个基因FtCHS，FtF3H和FtFLS-like，qRT-PCR 分析表明Phe （1 mg·L-1 -1 ）处理4 d，FtCHS相对表达量为对照的 4.84 倍，Phe （4 mg·L ）处理5 d，FtF3H相对表 达量为对照的 1.06 倍，Phe （2 mg·L-1）处理5 d，FtFLS-like相对表达量为对照的3.90 倍；UV-C辐射 1—3 h， FtCHS、FtF3H和FtFLS-like相对表达量分别高于对照。而FtFLS-like基因，仅在UV-C辐射 1 h，相对表达量升高 为对照的127.71 倍。【结论】添加不同浓度Phe前体及不同时间UV-C辐射，芦丁含量变化及与芦丁合成相关基因表 达量存在差异，为进一步探讨芦丁生物合成途径及影响因素奠定基础。 关键词：苦荞；芦丁；苯丙氨酸；UV-C；基因表达 Effect of Exogenous L-Phentermine and UV-C on the Accumulation of Rutin Compounds and the Expression of Rutin Biosynthesis Genes in Fagopyrum tartaricum SUN Zhao-xia, HOU Si-yu, YANG Wu-de (Institute of Dry Farming Engineering , Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, Shanxi) Abstract: 【Objective 】The objective of this study is to investigate the content of rutin and the expression of the related genes in response to L-phentermine (Phe) and UV-C treatment, and to provide molecular information for high rutin content buckwheat breeding. 【Method