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中国农业科学 , ():
2003 36 5 561 - 566
Scientia Agricultura Sinica
库尔勒香梨脉黄病毒 RT-PCR 检测技术研究
牛建新,刘连科,王小兵 ,覃伟铭
(石河子大学新疆作物高产研究中心,石河子 832003 )
摘要:以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对总RNA 提取方法进行了研究,从中筛选出了适合库尔勒香梨总RNA 的提取
方法。结果表明,要获得良好的 扩增, 体系中 浓度、互补引物、 、模板的浓度要分别达到 ·
RT-PCR RT dNT Ps A MV 0 . 1 mmol
- 1 - 1 - 1 - 1
、 · 、 · 、 · 以上。此外,使用 能有效抑制 体系中 对病毒 的降解作
L 0 . 2 mol L 0 . 05 U l 0 . 0 1 g l RNasin RT RNase RNA
µ µ µ µ
- 1 - 1
用,可使 过程顺利进行; 体系中 浓度至少要达到 · , · 可以获得最佳的扩增效
RT PCR dNT Ps 0 . 1 mmol L 0 . 2 ~ 0 . 3 mmol L
果; - 1 - 1 2 + - 1
浓度要达到 · 以上;引物浓度适宜范围 · ; 要达到 · 以上。
Taq E 0 . 0 15 U l 0 . 3 ~ 0 . 7 mol L Mg 1. 26 mmol L
µ µ
关键词:库尔勒香梨;梨脉黄病毒;
RT-PCR
Studies on RT-PCR Detect ion TechnoIogy of ViraI Diseases in
KuaIa Pear
, , ,
NI U Jian-xin LI U Lian-ke WA N G Xiao-bing QIN Wei-ming
( , , )
Research
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