库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究.pdfVIP

库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究.pdf

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中国农业科学 , (): 2003 36 5 561 - 566 Scientia Agricultura Sinica 库尔勒香梨脉黄病毒 RT-PCR 检测技术研究 牛建新,刘连科,王小兵 ,覃伟铭 (石河子大学新疆作物高产研究中心,石河子 832003 ) 摘要:以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对总RNA 提取方法进行了研究,从中筛选出了适合库尔勒香梨总RNA 的提取 方法。结果表明,要获得良好的 扩增, 体系中 浓度、互补引物、 、模板的浓度要分别达到 · RT-PCR RT dNT Ps A MV 0 . 1 mmol - 1 - 1 - 1 - 1 、 · 、 · 、 · 以上。此外,使用 能有效抑制 体系中 对病毒 的降解作 L 0 . 2 mol L 0 . 05 U l 0 . 0 1 g l RNasin RT RNase RNA µ µ µ µ - 1 - 1 用,可使 过程顺利进行; 体系中 浓度至少要达到 · , · 可以获得最佳的扩增效 RT PCR dNT Ps 0 . 1 mmol L 0 . 2 ~ 0 . 3 mmol L 果; - 1 - 1 2 + - 1 浓度要达到 · 以上;引物浓度适宜范围 · ; 要达到 · 以上。 Taq E 0 . 0 15 U l 0 . 3 ~ 0 . 7 mol L Mg 1. 26 mmol L µ µ 关键词:库尔勒香梨;梨脉黄病毒; RT-PCR Studies on RT-PCR Detect ion TechnoIogy of ViraI Diseases in KuaIa Pear , , , NI U Jian-xin LI U Lian-ke WA N G Xiao-bing QIN Wei-ming ( , , ) Research

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