腺苷甲硫氨酸对成肌细胞成脂分化及脂肪沉积的影响.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(18):3841-3848 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.18.017 腺苷甲硫氨酸对成肌细胞成脂分化及脂肪沉积的影响 于渤洋, 吕文涛, 巨婷婷, 刘 洋, 姜美华, 尹靖东 （中国农业大学动物科技学院/动物营养学国家重点实验室，北京 100193 ） 摘要：【目的】以小鼠成肌细胞（C2C12）为模型探讨蛋氨酸代谢产物腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine， SAM）对肌肉来源的多能干细胞成脂分化及脂肪沉积的影响。【方法】分别用含有0、0.25、1.0和2.0 mmol·L-1 SAM 的培养基处理细胞，在处理后的0、24、36和48 h分别对各处理组细胞进行油红O 染色观察细胞形态并测定光密 度（OD）值；在处理后第 2 天收集细胞总 RNA 与总蛋白，分别用 RT-PCR 和 western blotting 方法检测细胞成脂 相关基因的 mRNA 与蛋白表达水平。【结果】经 SAM 处理后，细胞表现出脂肪细胞的形态特征；细胞内脂肪沉积水 平上升，并且随SAM处理浓度的升高呈现出剂量依赖效应；细胞的脂肪特异性基因PPARγ、C/EBPα的mRNA及蛋 白表达水平显著升高（P＜0.05）；其它特异性基因aP2、FAS及SREBP-1的表达在经SAM 处理后呈剂量依赖性升高 （ -1 P＜0.05），其中2.0 mmol·L SAM处理组升高最为显著，三者mRNA表达水平分别上升了6.86（P＜0.01）、3.45 （ P＜0.05）和3.48（P＜0.01）倍。【结论】SAM可以促进C2C12细胞成脂分化及细胞内脂肪的沉积。 关键词：小鼠; 成肌细胞; 腺苷甲硫氨酸; 成脂分化; 脂肪沉积 Effects of S-Adenosylmethionine (SAM) on Adipogenic Differentiation and Lipid Accumulation of C2C12 Cells YU Bo-yang, LÜ Wen-tao, JU Ting-ting, LIU Yang, JIANG Mei-hua, YIN Jing-dong (College of Animal Science, China Agricultural University/State Key Laboratory of Animal Nutrition, Beijing 100193) Abstract: 【Objective 】This experiment was conducted to investigate the effects of S-adenosylmethionine (SAM) on adipogenesis and lipogenesis of C2C12 mouse myoblast. 【Method 】Cells were cultured in high glucose DMEM medium containing 0 mmol·L-1, 0.25 mmol·L-1, 1.0 mmol·L-1, and 2.0 mmol·L-1 SAM. After treated for 0 h, 24 h, 36 h, and 48 h, cells were stained with Red Oil O and observed under microscope. The lipid accumulation in cytosol was determined by optical density (OD) measurement. After being treated for 2 d, cells were harvested for collection of t