苹果茎沟病毒的子特性及实时荧光rt-pcr检测方法的研究.pdfVIP

苹果茎沟病毒的分子特性及实时荧光RT-PCR 检测方法的研究 姓 名：郭立新(植物病理学) 导师姓名：向本春教授朱水芳研究员 摘 要 库尔勒香梨是新疆名优特产瓜果．因其独特的风味受到国内外消费者的亲睐。但近年来其外形 色泽发生变化、口感降低、品质退化，严重威胁这一名优水果的生产和发展。据报道这种情况的发 生与病毒病的发生存在一定关系。 生物学症状上与国内外已报道的ASGV分离物存在很大差异，为此本论文以KRL．1总RNA为模板， 序列分析。结果表明：KRL．1 其它分离物CP基因的核苷酸同源性为90％曲3％，氨基酸同源性为94‰98％，由此进一步从分子水 该病毒的分子生物学检测方法的研究奠定了基础。 ASGV在果树上的潜隐感染较普遍，在果树体内浓度又很低，且一般不产生明显症状，必须采 取特定的方法才能明确果树是否潜带此病毒。由于以往检测苹果茎沟病毒的指示植物法、血清学法 及分子生物学方法存在不足之处，为此本研究再根据ASGV序列分析结果，找出各分离物外壳蛋白 荧光RT-PCR检测方法。1硇Man-MGB探针3’端具有小沟结合分子(minor酽oovebinder，MGB)提高 了探针的Tm值，缩短了探针长度，解决了苹果茎沟病毒各分离物之间基因组变异较大、难以找到 法快速、灵敏，整个检测过程完全闭管，无需PCR后处理。这为今后库尔勒香梨田间ASGV的检测 提供依据，为无毒茁木生产奠定基础。 andreal-timefluorescent MolecularCharacterization RT-PCR stem virus Detection ofApplegrooving Name：Lixin GUO(Phytopathology) Advisor：Prof．BenchunXIANG ZHU Prof．Shuifang isa Abstract：Kualafamousfruit inKualain ofits pear varietyonlyproduced Xinjiang．Because particular lot at and winsa ofconsumershome and have flavor,it color abroad．But，recently,itsappearance changed． Its has the and become these menace marketvalueofthefamousfruit poorer．All production quality greatly were to toviral Allthese relate infection． reported changes virus Was