挥发油及其活性分组合与富马酸钠共同添加对体外瘤胃发酵和湖羊养分消化的影响.pdf

中文摘要 中文摘要 研究和开发瘤胃发酵调控剂，抑制反刍动物瘤胃甲烷的产生是近年来的研究 热点，挥发油和富马酸盐是目前研究报道较多的两种新型瘤胃发酵调控剂。本试 验分别采用体外和体内试验研究了挥发油与活性成分不同组合对瘤胃发酵的作 用差异，及其与富马酸钠共同添加对湖羊瘤胃甲烷产生、微生物区系和营养物质 消化的影响；同时结合分子生物学方法，进一步阐明了挥发油对瘤胃微生物的影 响及其作用机制。为将二者的组合作为瘤胃发酵调控剂的提供了理论依据。 试验一：为研究挥发油与其活性成分对瘤胃发酵的影响差异，本试验采用压 力传感器式体外产气系统，分别将牛至油、肉桂油及其对应的活性成分香芹酚和 肉桂醛以O、50、200和500mg／L的水平添加到体外发酵液中，研究它们对瘤胃发 酵和甲烷产生的影响。结果表明，产气量、挥发性脂肪酸(VFA)和甲烷产量均 随挥发油添加浓度的增加而显著降低(P0．05)，200mg／L的添加浓度下，香芹 酚和肉桂醛对VFA的降低幅度均大于30％，而500mg／L的油和活性成分均降低了 VFA达50％以上，表明瘤胃发酵显著抑制。同等浓度下，活性成分对瘤胃发酵的 抑制幅度大于其对应的油，且甲烷抑制潜势也低于对应的油；高浓度下，香芹酚 和牛至油对发酵抑制幅度大于肉桂醛和肉桂油。可见，不同挥发油对瘤胃具有不 同的作用效果，而单种活性成分对甲烷抑制的效果弱于对应的天然挥发油。 试验二：研究不同挥发油组合和活性成分组合组合对瘤胃发酵的影响，并筛 选可降低瘤胃甲烷的优化组合。本试验将丁香油、肉桂油、牛至油和柠檬油按照 1：2：3：4，2：1：4：3，3：4：1：2，4：3：2：1和1：1：1：1的比例组成5种不同的挥发油组合 照相同的比例组成5种不同的挥发油活性成分组合(EOACl，EOAC2，EOAC3， EOAC4，EOAC5)，采用压力传感器式体外培养系统研究了这些组合对体外甲烷 产量和瘤胃发酵指标的影响，各种组合的添加浓度为0、50、200和500mg／L。研 究结果表明，添jJI：IEOC和EOAC对产气量、甲烷产量和VFA的产量的影响均呈一 种浓度依赖趋势。在同等挥发油添加浓度下，甲烷的降低幅度的趋向明显高于 VFA和产气量的降低幅度。EOC和EOAC降低了瘤胃氨氮和们的比值，但对pH 值则无显著影响。通过氢平衡分析发现，500 mg／L的EOC5中氢被用于生成甲烷 IV 中文摘要 与挥发性脂肪酸的比值为各挥发油组最低，同时降低了62．3％的甲烷和17．9％的 TvFA，是具有最高甲烷抑制潜势的挥发油组合；而200 mg／L的EOAC5中氢被用 于生成甲烷与挥发性脂肪酸的比值为各活性成分组最低，降低了31．3％的甲烷， 好12．9％的VFA，是具有最高甲烷抑制潜势的活性成分组合。总体而言，挥发油 组合对甲烷的抑制潜力大于活性成分组合。 试验三：为研究挥发油及其活性成分和富马酸之间的协同作用，本试验采用 压力传感器式体外系统，以试验一中筛选的最优挥发油组合5(EOC5)及活性成 10，15mmol／L的富马酸一钠组合添加，研究二者对甲烷产生及瘤胃发酵指标和瘤 mmol／L的富马酸钠可进一步降低瘤胃 胃微生物数量的影响。结果表明，5和10 mmol／L的 甲烷排放，同时增加VFA的产量，EOC5和EOAC5两组均是在添加10 富马酸一钠时具有最大的甲烷抑制潜势。采用RT．PCR、法对该最优组合的甲烷菌、 flavefaciens进行定量 真菌、原虫和两种重要的纤维降解菌F．succinogenes与R 分析表明，瘤胃原虫被显著抑制，真菌和两种纤维降解菌的数量也有较大程度的 降低，但甲烷菌种群的数量降低幅度则明显的低于其他微生物。这些结果表明， 添加富马酸有利于挥发油对瘤胃甲烷的抑制，但挥发油添加抑制瘤